Untersuchungen zum Einfluß von Escherichia coli und Actinomyces pyogenes auf phänotypische und funktionelle Eigenschaften neutrophiler Granulozyten aus Blut und Uterus des Rindes:
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
UND
TERMINI
TECHNICI
.
9
1
EINLEITUNG
UND
ZIELSETZUNG
.
13
2
LITERATURUEBERSICHT
.
14
2.1
AETIOLOGIE
UND
BEDEUTUNG
DER
ENDOMETRITIS
PUERPERALIS
.
14
2.2
LEUKOZYTAERE
ABWEHRMECHANISMEN
PERIPARTALER
RINDER
.
16
2.2.1
POLYMORPHKERNIGE
NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN
AUS
DEM
BLUT
.
16
2.2.2
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
FUNKTIONALITAET
VON
PMN
IM
PERIPARTALEN
ZEITRAUM
.
18
2.2.3
BEDEUTUNG
BOVINER
PMN
FUER
DEN
ABGANG
DER
NACHGEBURT
UND
DIE
UTERINE
ABWEHRKAPAZITAET
.
19
2.3
ENDOGENE
EFFEKTE
AUF
DIE
UTERINEN
ZELLULAEREN
ABWEHRMECHANISMEN
.
21
2.3.1
EINFLUSS
VON
SEXUALSTEROIDEN
AUF
DIE
UTERINE
ZELLULAERE
ABWEHRKAPAZITAET
.
21
2.3.2
EFFEKTE
HUMORALER
FAKTOREN
DES
IMMUNSYSTEMS
AUF
DIE
UTERINE
ZELLULAERE
ABWEHRKAPAZITAET
.
22
2.4
BAKTERIELLE
EFFEKTE
AUF
UTERINE
ZELLULAERE
ABWEHRMECHANISMEN
.
25
2.4.1
BEDEUTUNG
DER
BAKTERIELLEN
KONTAMINATION
DES
UTERUS
FUER
DIE
PATHOGENESE
DER
ENDOMETRITIS
PUERPERALIS
.
25
2.4.2
UTERINE
POLYMORPHKERNIGE
NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN
.
26
2.4.3
EINFLUSS
VON
BAKTERIEN
AUF
DIE
FUNKTIONALITAET
VON
PMN
.
28
3
GERAETE,
MATERIALIEN
UND
METHODEN
.
33
3.1
GERAETE
.
33
3.2
MATERIALIEN
.
34
3.2.1
KLINIKBEDARF
.
34
3.2.2
LABORBEDARF
.
34
3.2.3
MEDIKAMENTE
UND
REAGENZIEN
.
35
3.2.4
KULTURMEDIEN
UND
PUFFER
.
37
3.2.4.1
KULTURMEDIEN
.
37
3.2.4.2
PMN-KULTURMEDIUM
(MEDIUM)
.
37
3.2.4.3
PUFFER
.
37
3.2.5
MATERIALIEN
FUER
DIE
DIFFERENZIERUNG
UND
SEPARATION
VON
LEUKOZYTEN
.
38
3.2.6
MATERIALIEN
FUER
DIE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
39
3.2.7
MATERIALIEN
FUER
DIE
INDIREKTE
MEMBRANIMMUNFLUORESZENZ
(MIF)
.
39
3.2.8
MATERIALIEN
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DER
PHAGOZYTOSEKAPAZITAET
VON
PMN
.
41
3.2.9
MATERIALIEN
FUER
DIE
BESTIMMUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
(ROS)
.
41
3.2.10
MATERIALIEN
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DER
ZYTOTOXISCHEN
KAPAZITAET
VON
PMN
.
42
3.2.11
MATERIALIEN
FUER
IN
VITRO
STIMULATIONSVERSUCHE.
44
3.2.12
TIERE
.
45
3.2.12.1
TIERE
ZUR
GEWINNUNG
VON
SERUM
.
45
3.2.12.2
PERIPARTALEKUEHE
.
45
3.2.12.3
DONOREN
FUER
LOCHIALSEKRET
.
45
3.2.12.4
TIERE
FUER
DIE
SEPARATION
VON
PMN
AUS
DEM
BLUT
FUER
IN
VITRO
UNTERSUCHUNGEN.
.46
3.3
METHODEN
.
46
3.3.1
ANZUECHTUNG
UND
PRAEPARATION
VON
BAKTERIEN
ZUR
KULTIVIERUNG
MIT
PMN
.
46
3.3.2
GEWINNUNG
UND
VERARBEITUNG
VON
LOCHIALSEKRET
ZUR
KULTIVIERUNG
MIT
PMN
.
49
3.3.3
GEWINNUNG
UND
ISOLIERUNG
VON
PMN
AUS
DEM
BLUT
.
49
3.3.3.1
BLUTENTNAHME
.
49
3.3.3.2
SERUMGEWINNUNG
.
49
3.3.3.3
ISOLIERUNG
NEUTROPHILER
GRANULOZYTEN
AUS
DEM
BLUT
.
50
3.3.4
GEWINNUNG
UND
ISOLIERUNG
VON
PMN
AUS
DEM
PUERPERALEN
UTERUS
.
51
3.3.5
METHODEN
ZUR
LEUKOZYTENDIFFERENZIERUNG
UND
-ZAHLBESTIMMUNG
.
51
3.3.5.1
AUSSTRICH
UND
FAERBUNG
NACH
WRIGHT
.
51
3.3.5.2
ZELLZAHLBESTIMMUNG
.
52
3.3.6
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
52
3.3.7
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
LEUKOZYTENDIFFERENZIERUNG,
-VITALITAETSBESTIMMUNG
UND
REFERENZZELLZAEHLMETHODE
.
53
3.3.8
INDIREKTE
MEMBRANIMMUNFLUORESZENZ
(MIF)
.
54
3.3.9
BESTIMMUNG
DER
PHAGOZYTOSEKAPAZITAET
VON
PMN
.
56
3.3.10
BESTIMMUNG
DER
GENERATION
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
(ROS)
DURCH
PMN
.
57
3.3.11
BESTIMMUNG
DER
ZYTOTOXISCHEN
KAPAZITAET
VON
PMN
.
59
3.3.12
STATISTISCHE
AUSWERTUNGSVERFAHREN
.
61
4
ERGEBNISSE
.
62
4.1
AUSWAHL
REPRAESENTATIVER
KEIME
FUER
IN
VITRO
UNTERSUCHUNGEN
BAKTERIELLER
EFFEKTE
AUF
PMN
DES
RINDES
.
62
4.1.1
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
QUALITAET
SOWIE
QUANTITAET
DER
BAKTERIELLEN
KONTAMINATION
UND
DER
PMN-KONZENTRATION
IM
FRUEHPUERPERALEN
UTERUS
.
62
4.1.2
EINFLUSS
DER
UTERINEN
BAKTERIELLEN
KONTAMINATION
AUF
DIE
EIGENSCHAFTEN
VON
UTERINEN
PMN
.
64
4.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
IN
VITRO
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRET
AUF
ISOLIERTE
PMN
AUS
DEM
BLUT
.
67
4.2.1
AUSWAHL
REPRAESENTATIVER
LOCHIALSEKRETPROBEN
FUER
IN
VITRO
EXPERIMENTE
.
67
4.2.2
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRETPRAEPARATIONEN
AUF
IMMUNPHAENOTYP
UND
FUNKTIONALITAET
VON
PMN
.
68
4.2.2.1
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRETPRAEPARATIONEN
AUF
DEN
IMMUNPHAENOTYP
VON
PMN
.
.69
4.2.2.2
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRETPRAEPARATIONEN
AUF
DIE
PHAGOZYTOSEFAHIGKEIT
VON
PMN
.
71
4.2.2.3
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRETPRAEPARATIONEN
AUF
DIE
BILDUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
(ROS)
DURCH
PMN
.
72
4.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
EINFLUSS
VON
PMN-KULTURUEBERSTAENDEN
AUF
EIGENSCHAFTEN
AUTOLOGER
PMN
.
74
4.3.1
GEWINNUNG
VON
KULTURUEBERSTAENDEN
AKTIVIERTER
PMN
.
74
4.3.2
EFFEKTE
VON
PMN-KULTURUEBERSTAENDEN
AUF
IMMUNPHAENOTYP
UND
ROS-BILDUNG
AUTOLOGER
PMN
.
75
4.4
EINFLUSS
BAKTERIELLER
PRODUKTE
AUF
IMMUNPHAENOTYP
UND
FUNKTIONALITAET
VON
PMN
.
77
4.4.1
HERSTELLUNG
VON
E.
COLI
UND
A.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
.
77
4.4.2
EFFEKTE
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
BOVINE
PMN
IN
VITRO
.
79
4.4.2.1
EINFLUSS
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
VITALITAET
VON
PMN
.
79
4.4.2.2
EINFLUSS
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
DEN
IMMUNPHAENOTYP
VON
PMN
.
80
4.4.2.3
EINFLUSS
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
PHAGOZYTOSEKAPAZITAET
VON
PMN
.
82
4.4.2.4
EINFLUSS
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
BILDUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
(ROS)
DURCH
PMN
.
84
4.4.2.5
EINFLUSS
VON
E.
COZZ-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
ANTIKOERPERUNABHAENGIGE
ZYTOTOXIZITAET
(AICC)VONPMN
.
86
4.4.3
EFFEKTE
VON
A.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
BOVINE
PMN
IN
VITRO
.
87
4.4.3.1
EINFLUSS
VON/1.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
VITALITAET
VON
PMN
.
87
4.4.3.2
EINFLUSS
VON
A.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
DEN
IMMUNPHAENOTYP
VON
PMN
88
4.4.3.3
EINFLUSS
VON?4.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
PHAGOZYTOSEKAPAZITAET
VON
PMN
.
90
4.4.3.4
EINFLUSS
VON
A.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
BILDUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
(ROS)
DURCH
PMN
.
92
4.4.3.5
EINFLUSS
VON
A.
PYOGEZZES-PRAEPARATIONEN
AUF
DIE
ANTIKOERPERUNABHAENGIGE
ZYTOTOXIZITAET
(AICC)
VON
PMN
.
94
4.4.4
VERGLEICHENDE
UNTERSUCHUNG
ZUR
BEEINFLUSSBARKEIT
VON
PMN
DURCH
BAKTERIELLE
PRODUKTE
.
95
4.5
UNTERSUCHUNGEN
ZU
LPS-BEDINGTEN
EFFEKTEN
AUF
PMN-EIGENSCHAFTEN
.
101
4.5.1
HEMMUNG
VON
LPS-EFFEKTEN
DURCH
POLYMYXIN
B
.
101
4.5.2
BETEILIGUNG
VON
LPS
AN
DER
WIRKUNG
VON
BAKTERIENPRAEPARATIONEN
AUF
PMN
.
103
5
DISKUSSION
.106
5.1
KONZEPTIONELL-METHODISCHE
BETRACHTUNGEN
.
106
5.2
DIE
DOMINIERENDE
KEIMFLORA
IM
UTERUS
VON
KUEHEN
MIT
ENDOMETRITIS
PUERPERALIS.
107
5.3
INITIALE
BEOBACHTUNGEN
ZUR
BEEINFLUSSUNG
UTERINER
PMN
.
108
5.4
DER
EINFLUSS
VON
LOCHIALSEKRET
AUF
PHAENOTYPISCHE
UND
FUNKTIONELLE
PARAMETER
VON
PMN
.
109
5.5
BAKTERIELLE
PRODUKTE
UND
IHR
DIREKTER
EINFLUSS
AUF
PMN
.
111
5.5.1
EINFLUESSE
AUF
DEN
IMMUNPHAENOTYP
VON
PMN
.
111
5.5.2
EINFLUESSE
AUF
FUNKTIONELLE
KAPAZITAETEN
VON
PMN
.
112
5.6
ERKENNTNISSE
ZU
PATHOGENESEMECHANISMEN
DER
ENDOMETRITIS
PUERPERALIS
DES
RINDES
.
113
6
ZUSAMMENFASSUNG
.115
7
SUMMARY
.117
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
119 |
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| title_full | Untersuchungen zum Einfluß von Escherichia coli und Actinomyces pyogenes auf phänotypische und funktionelle Eigenschaften neutrophiler Granulozyten aus Blut und Uterus des Rindes vorgelegt von Carola Oßadnik |
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| title_short | Untersuchungen zum Einfluß von Escherichia coli und Actinomyces pyogenes auf phänotypische und funktionelle Eigenschaften neutrophiler Granulozyten aus Blut und Uterus des Rindes |
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| topic_facet | cattle cows blood Escherichia coli Actinomyces pyogenes uterus Hochschulschrift |
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