Effekte selektiver Modulation Cyclin-abhängiger Kinasen beim multiplen Myelom:
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS MULTIPLE MYELOM 2
1.1.1 DEFINITION 2
1.1.2 PATHOGENESE 2
1.1.3 MOLEKULARE KLASSIFIKATION 3
1.2 CYCLINE UND CYCLIN-ABHAENGIGE KINASEN 4
1.2.1 REGULATION DES ZELLZYKLUS 5
1.2.2 REGULATION DER TRANSKRIPTION 8
1.3 N F K B IM MULTIPLEN MYELOM 9
1.3.1 DER NF^B-WEG 9
1.4 APOPTOSE 12
1.4.1 DIE BCL-2-FAMILIE 12
1.5 NEUE THERAPIEANSAETZE: CDK-INHIBITOREN 14
1.5.1 SELICICLIB (ROSCOVITINE, CYC-202) 15
1.6 ZIELE DIESER ARBEIT 16
2 MATERIAL UND M E T H O D E N 1 7
2.1 MYELOMZELLLINIEN 18
2.2 KULTURMEDIEN U N D ZUSAETZE 18
2.2.1 KULTURMEDIEN 18
2.2.2 ZUSAETZE 18
2.2.3 GEBRAUCHSFERTIGE KULTURMEDIEN 18
2.3 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 19
2.4 PUFFER 20
2.5 CYCLIN-ABHAENGIGE KINASE-INHIBITOREN 20
2.6 ANTIKOERPER FUER IMMUNBLOTS 21
2.6.1 PRIMAERANTIKOERPER 21
2.6.2 SEKUNDAERANTIKOERPER 21
2.7 VERBRAUCHSMATERIALEN 21
2.8 GERAETE 22
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IMAGE 2
2.9 SOFTWARE 23
2.10 ZELLKULTUR 23
2.10.1 KULTIVIERUNG VON ZELLEN 23
2.10.2 DICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION 23
2.10.3 ZELLZAEHLUNG 24
2.10.4 EXPOSITIONEN ZUR TESTSUBSTANZ 24
2.11 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 25
2.11.1 APOPTOSEQUANTIFIZIERUNG MIT ANNEXIN-V-FITC- U N D PROPIDIUM-
IODID-FAERBUNG 25
2.12 IMMUNBLOTS 25
2.12.1 PROTEINEXTRAKTION 25
2.12.2 PROTEINDENATURIERUNG 26
2.12.3 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) 26
2.12.4 HALBTROCKENER PROTEINTRANSFER 27
2.12.5 IMMUNBLOTANALYSE 27
2.12.6 ABLOESEN VON ANTIKOERPERN VON DER PVDF-MEMBRAN 28
2.12.7 DENSITOMETRISCHE AUSWERTUNG 28
3 ERGEBNISSE 2 9
3.1 DER EFFEKT VON LDC-000067 U N D SELICICLIB AUF DAS UEBERLEBEN VON
MYELOMZELLEN 30
3.2 DIE WIRKUNG VON LDC-000067 AUF DIE TRANSKRIPTION 34
3.2.1 LDC-000067 FUEHRT ZU DEPHOSPHORYLIERUNG DER RNA-POLYMERASE
II 34
3.2.2 LDC-000067 FUEHRT ZU EINER ERNIEDRIGTEN EXPRESSION VON MCL-1 35
3.3 DIE WIRKUNG VON LDC-000067 AUF DEN NF/D3-WEG 38
3.3.1 LDC-000067 HEMMT DIE PHOSPHORYLIERUNG DER NF/CB-UNTEREINHEIT P65
(RELA) 38
3.3.2 LDC-000067 HEMMT DIE PHOSPHORYLIERUNG VON I ^ B A 39
3.3.3 EFFEKTE VON LDC-000067 AUF DIE EXPRESSION VON CYLD . . . 42
3.4 EFFEKTE VON LDC-000067 AUF DIE EXPRESSION VON CYCLIN D L U N D CY
CLIN D2 43
4 DISKUSSION 4 5
4.1 LDC-000067 INHIBIERT DIE RNA-POLYMERASE II-ABHAENGIGE TRANSKRIP
TION U N D SENKT DIE PROTEINEXPRESSION VON MCL-1 46
4.2 LDC-000067 HEMMT DIE NF/CB-AKTIVITAET 49
4.3 EFFEKTE VON LDC-000067 AUF DIE EXPRESSION CYCLIN D L U N D CYCLIN D2
55
IMAGE 3
5 LITERATURVERZEICHNIS 5 9
6 DANKSAGUNG 7 1
7 LEBENSLAUF 7 3
8 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 7 5
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