Holdings: Biologische Wirkweise von Cuprizon und seinen Derivaten

Biologische Wirkweise von Cuprizon und seinen Derivaten:

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Bibliographic Details
Main Author:	Mertens, Meike 1992- (Author)
Format:	Thesis Book
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS PUBLIKATION / VORVEROEFFENTLICHUNG ............................................................................................ III INHALTSVERZEICHNIS .................................................................................................................... V ABKUERZUNGSVERZEICHNIS ......................................................................................................... VII 1. EINLEITUNG ................................................................................................................. 1 1.1. MULTIPLE SKLEROSE ....................................................................................................... 1 1.1.1. OXIDATIVER STRESS UND DAS NRF2-SYSTEM .................................................................. 3 1.1.2. DEMYELINISIERUNG ..................................................................................................... 7 1.1.3. OLIGODENDROZYTEN ..................................................................................................... 8 1.1.4. NEUROPATHOLOGIE DER MS ........................................................................................ 11 1.2. CUPRIZON .................................................................................................................. 13 1.3. GESCHICHTE DES CUPRIZONS ...................................................................................... 14 1.4. CUPRIZON-MAUS-MODELL ............................................................................................ 15 1.4.1. UNTERSCHIEDE UND GEMEINSAMKEITEN VON MS UND DEM CUPRIZON-MAUS-MODELL 17 1.5. WIRKMECHANISMUS VON CUPRIZON ........................................................................... 20 1.5.1. INHIBITION KUPFERABHAENGIGER SYSTEME .................................................................... 20 1.5.2. INHIBITION ANTIOXIDATIVER ENZYME ............................................................................ 22 1.5.3. ZUSAMMENFASSUNG ................................................................................................. 24 2. ZIELSETZUNG ........................................................................................................... 25 3. MATERIAL UND METHODEN ........................................................................................ 26 3.1. SUPEROXIDDISMUTASE AKTIVITAETSASSAY ...................................................................... 26 3.1.1. REKONSTITUTION DER BOVINEN SOD ........................................................................... 26 3.1.2. PRINZIP DES SOD-ASSAYS ........................................................................................ 27 3.1.3. DURCHFUEHRUNG DES ASSAYS ....................................................................................... 28 3.2. DIREKTE HEMMUNG ISOLIERTER BOVINER SOD DURCH CUPRIZON ................................. 31 3.3. ZELLKULTUR .................................................................................................................. 33 3.3.1. ZELLEN ...................................................................................................................... 33 3.3.2. TRANSFEKTION DER OLINEU-ZELLEN ............................................................................. 34 3.3.3. LAGERUNG UND AUFTAUEN DER ZELLEN ....................................................................... 35 3.3.4. KULTIVIEREN UND PASSAGIEREN DER ZELLEN ................................................................ 35 3.3.5. ZELLZAHLBESTIMMUNG ............................................................................................... 36 3.4. GENEXPRESSIONSANALYSE NACH CUPRIZONBEHANDLUNG ............................................. 37 3.4.1. BEHANDLUNG DER ZELLEN ........................................................................................... 37 3.4.2. RNA-ISOLATION .......................................................................................................... 37 3.4.3. SPEKTRALPHOTOMETRISCHE RNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG UND VERDUENNUNG .... 38 3.4.4. REVERSE TRANSKRIPTION ............................................................................................ 38 3.4.5. POLYMERASEKETTENREAKTION UND GELELEKTROPHORESE .............................................. 39 3.4.6. QUANTITATIVE REAL TIME PCR ................................................................................. 40 3.5. AUSWIRKUNGEN VON CUPRIZON AUF DIE SOD-AKTIVITAET VON OLINEU-ZELLEN ............... 42 3.6. SOD-AKTIVITAETSASSAY AUS DEM CUPRIZON-MAUS-MODELL ........................................ 43 3.7. DIREKTE HEMMUNG ISOLIERTER, BOVINER SOD DURCH BIMPI ...................................... 44 3.8. TOXIZITAETSTEST MIT BIMPI ..........................................................................................45 3.8.1. FUNKTIONSWEISE DES CELLTITER-BLUE CELL VIABILITY ASSAYS .....................................45 3.8.2. DURCHFUEHRUNG DES CELLTITER-BLUE CELL VIABILITY ASSAYS .......................................46 3.9. BESTIMMUNG DES GESAMTPROTEINGEHALTES ............................................................. 47 3.10. DARSTELLUNG UND AUSWERTUNG DER DATEN ................................................................. 48 4. ERGEBNISSE .............................................................................................................49 4.1. SOD-AKTIVITAET BOVINER SOD NACH BEHANDLUNG MIT CUPRIZON ................................ 49 4.2. SOD-AKTIVITAET VON ZELLEN NACH BEHANDLUNG MIT CUPRIZON .................................... 51 4.3. QUANTITATIVE GENEXPRESSIONSANALYSE ................................................................... 53 4.4. CUPRIZONWIRKUNG AUF DIE SOD IN VIVO ................................................................... 55 4.5. SOD-AKTIVITAET BOVINER SOD NACH BEHANDLUNG MIT BIMPI ..................................... 56 4.6. CTB-ASSAY NACH EXPOSITION DURCH BIMPI ............................................................. 58 5. DISKUSSION ............................................................................................................. 60 5.1. CUPRIZON ALS KUPFERCHELATOR .................................................................................... 60 5.2. ENZYMHEMMUNG DURCH CUPRIZON - DIE SOD-HEMMUNG ..................................... 64 5.3. CUPRIZON UND OXIDATIVER STRESS .............................................................................. 66 5.4. CUPRIZON UND DIE UNFOLDED PROTEIN RESPONSE (UPR) ............................................ 67 5.5. CUPRIZON IN DER ZELLKULTUR ....................................................................................... 68 5.6. BIMPI - DAS BESSERE CUPRIZON ............................................................................ 70 5.7. SCHLUSSFOLGERUNG .................................................................................................... 73 5.8. AUSBLICK .................................................................................................................... 74 6. ZUSAMMENFASSUNG ............................................................................................... 75 7. LITERATURVERZEICHNIS .............................................................................................. 77 8. ANHANG .................................................................................................................... 88 8.1. VERBRAUCHSMATERIAL .................................................................................................. 88 8.2. SOFTWARE ................................................................................................................... 89 8.3. GERAETE ...................................................................................................................... 89 8.4. CHEMIKALIEN ............................................................................................................ 91 8.5. ZELLKULTURMEDIEN ...................................................................................................... 94 8.6. PUFFER ........................................................................................................................ 95 8.7. LOESUNGEN ................................................................................................................. 97 ABBILDUNGSVERZEICHNIS ........................................................................................................... 99 TABELLENVERZEICHNIS .............................................................................................................. 100 DANKSAGUNG ......................................................................................................................... 101 ERKLAERUNG § 5 ABS. 1 ZUR DATENAUFBEWAHRUNG .................................................................... 103 EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG GEMAESS § 5 ABS. (1) UND § 11 ABS. (3) ....................................... 105 LEBENSLAUF ............................................................................................................................ 104 VI
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