Regulation der Fruchtkörperbildung bei dem Ascomyceten Sordaria macrospora:
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| Format: | Thesis Book |
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| Published: |
Berlin [u.a.]
Cramer
1998
|
| Series: | Bibliotheca mycologica
172 |
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINFUEHRUNG
.
1
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
VIELE
ASCOMYCETEN
BILDEN
BEI
DER
SEXUELLEN
MORPHOGENESE
KOMPLEXE
MULTIZELLULAERE
STRUKTUREN
AUS
.
1
3.
DIE
VERSCHIEDENEN
STADIEN
DER
ASCOKARPDIFFERENZIERUNG
KOENNEN
DURCH
MUTANTEN
CHARAKTERISIERT
WERDEN
.
3
4.
DIE
ASCOKARPENTWICKLUNG
IST
ABHAENGIG
VOM
ZUSAMMENWIRKEN
VIELER
EXOGENER
FAKTOREN
.
5
4.1
LICHT
STEUERT
VERSCHIEDENE
PROZESSE
DER
SEXUELLEN
FORTPFLANZUNG
.
5
4.2
NAEHRSTOFFMANGEL
KANN
DIE
SEXUELLE
FORTPFLANZUNG
AUSLOESEN
.
6
5.
DIE
FRUCHTKOERPERDIFFERENZIERUNG
UNTERLIEGT
EINER
ENDOGENEN
KONTROLLE
.
7
5.1
PILZLICHE
HORMONE
DIENEN
DER
ZELLKOMMUNIKATION
WAEHREND
DER
SEXUELLEN
DIFFERENZIERUNG
.
7
5.2
LACCASEN
SIND
MOEGLICHE
SCHLUESSELENZYME
DER
PILZLICHEN
MULTI
ZELLULAEREN
ENTWICKLUNG
.
9
5.3
DIE
KREUZUNGSTYP-PRODUKTE
SIND
AN
DER
REGULATION
DER
SEXUELLEN
FORTPFLANZUNG
BETEILIGT
.
10
5.4
IN
HOEHEREN
ASCOMYCETEN
SIND
PHASENSPEZIFISCHE
PROTEINE
NACH
WEISBAR
.
13
5.5
MOLEKULARGENETISCHE
ANSAETZE
FUEHRTEN
ZUR
KLONIERUNG
VON
ENT
WICKLUNGSGENEN
MIT
FUNKTIONEN
IN
DER
SEXUELLEN
FORTPFLANZUNG
.
13
6.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
.
15
II.
PROBLEMSTELLUNG
.
18
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
22
1.
MATERIAL
.
22
1.1
STAEMME
.
22
1.2
PLASMIDE
UND
COSMIDE
.
23
1.3
GENBIBLIOTHEK
.
24
1.4
OLIGONUKLEOTIDE
.
24
1.5
CHEMIKALIEN
.
25
1.6
ENZYME
.
26
1.7
MEDIEN
.
26
1.8
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER
.
26
2.
METHODEN
.
27
2.1
KULTURBEDINGUNGEN
.
27
2.2
FORMALGENETISCHE
ANALYSEN
.
27
2.3
UV-MUTAGENESEN
.
28
2.4
MIKROSKOPISCHE
ANALYSEN
.
28
2.4.1
LICHTMIKROSKOPIE
.
28
2.4.2
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
29
2.5
TRANSFORMATIONEN
.
29
2.5.1
ESCHERICHIA
COLI
.
29
2.5.2
SORDARIA
MACROSPORA
.
29
2.6
ISOLIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
30
2.7
GELELEKTROPHORESE
.
31
2.8
SOUTHERN
BLOTS
UND
DNA-DNA-HYBRIDISIERUNGEN
.
31
2.9
NORTHERN
BLOTS
UND
DNA-RNA-HYBRIDISIERUNGEN
.
32
2.10
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA
.
32
2.11
DELETIONEN
MIT
EXONUKLEASE
III/NUKLEASE
S1
.
32
2.12
DNA-SEQUENZIERUNG
.
32
2.13
OLIGONUKLEOTIDSYNTHESE
.
33
2.14
POLYMERASE
KETTENREAKTION
REAKTION
(PCR)
.
33
2.15
REVERSE
TRANSKRIPTION
UND
POLYMERASE
KETTEN
REAKTION
(RT-PCR)
.
33
2.16
IN
VITRO-REKOMBINATION
VON
DNA
.
33
2.17
IN
W'ZRO-MUTAGENESE
.
34
2.18
AUSWERTUNG
VON
NUKLEOTID
UND
AMINOSAEURESEQUENZEN
.
34
2.19
SICHERHEITSBESTIMMUNGEN
.
34
IV.
ERGEBNISSE
.
35
1.
DURCH
MUTAGENESEN
KOENNEN
ENTWICKLUNGSMUTANTEN
VON
SORDARIA
MACROSPORA
HERGESTELLT
WERDEN
.
35
1.1
DIE
ENTWICKLUNGSMUTANTEN
WEISEN
STOERUNGEN
IN
UNTERSCHIED
LICHEN
STADIEN
DER
FRUCHTKOERPERDIFFERENZIERUNG
AUF
.
35
1.2
DIE
ENTWICKLUNGSMUTANTEN
WURDEN
EINER
FORMALGENETISCHEN
ANALYSE
UNTERZOGEN
.
39
2.
DIE
PRO
1
-MUTATION
KANN
MIT
HILFE
MOLEKULARER
MARKER
KARTIERT
WERDEN
.
42
2.1
DIE
DNA-VERMITTELTE
TRANSFORMATION
ERMOEGLICHT
DIE
HERSTELLUNG
MOLEKULARER
CHROMOSOMENMARKER
.
42
2.2
DIE
PRO
1
-MUTATION
IST
AUF
CHROMOSOM
VI/VII
LOKALISIERT
.
48
3.
DIE
PRO
1
-MUTATION
KANN
MIT
KLONEN
EINER
S.
MACROSPORA
COSMID-BANK
KOMPLEMENTIERT
WERDEN
.
51
3.1
DER
COSMID-KLON
D6
TRAEGT
DIE
GENETISCHE
INFORMATION
ZUR
RESTAURIERUNG
DER
FERTILITAET
IN
DER
PRO
1
-MUTANTE
.
51
3.2
IN
KOMPLEMENTIERTEN
PRO
1
-TRANSFORMANTEN
KANN
REKOMBINANTE
DNA
NACHGEWIESEN
WERDEN
.
55
4.
DIE
MOLEKULARE
ANALYSE
DES
KOMPLEMENTIERENDEN
DNA-FRAGMENTS
FUHRT
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
DES
SDRL-GENS
.
57
4.1
DAS
KOMPLEMENTIERENDE
DNA-FRAGMENT
TRAEGT
EINEN
OFFENEN
LESERAHMEN,
DER
FUER
EINEN
PUTATIVEN
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
KODIERT
.
57
4.2
TRANSKRIPTE
DES
SDRL
-GENS
SIND
IM
WILDSTAMM
NACHWEISBAR,
FEHLEN
JEDOCH
IN
DER
PRO
1
-MUTANTE
.
62
5.
DIE
STERILITAET
DER
PRO
1
-MUTANTE
WIRD
DURCH
EINE
DELETION
VERURSACHT
.
63
6.
DAS
SDRL-GEN
IST
AN
DER
KONTROLLE
DER
FRUCHTKOERPERBILDUNG
BETEILIGT
.
66
6.1
EIN
STROMAUFWAERTS
VOM
SDRL-ORF
GELEGENES
215
BP
FRAGMENT
IST
FUER
DIE
VOLLSTAENDIGE
KOMPLEMENTATION
DER
PRO
1
-MUTATION
VON
BEDEUTUNG
.
66
6.2
EINE
IN
VI/RO-MUTAGENESE
IM
BEREICH
DER
PUTATIVEN
DNA-BINDE-
DOMAENE
DES
SDR1-POLYPEPTIDS
ZEIGT
DIE
NOTWENDIGKEIT
DIESER
REGION
FUER
DIE
RESTAURIERUNG
DER
FERTILITAET
IN
DER
PRO
1
-MUTANTE
.
70
V.
DISKUSSION
.
72
1.
MUTANTEN-ANALYSEN
ERLAUBEN
DIE
CHARAKTERISIERUNG
DER
SEXUELLEN
MORPHOGENESE
VON
SORDARIA
MACROSPORA
.
72
1.1
DIE
MUTANTEN
PRO
1,
PRO
10
UND
PER5
ZEIGEN
STOERUNGEN
IN
BISLANG
NOCH
NICHT
CHARAKTERISIERTEN
STADIEN
DER
FRUCHTKOERPERDIFFEREN
ZIERUNG
VON
S.
MACROSPORA
.
72
1.2
DIE
VERFUEGBAREN
ENTWICKLUNGSMUTANTEN
ERMOEGLICHEN
EINE
EXEM
PLARISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DES
KOMPLEXEN
PROZESSES
DER
SEXUELLEN
FORTPFLANZUNG
.
75
1.3
DIE
INDUZIERBARKEIT
DER
MUTANTEN
PROL
UND
PROLO
LIEFERT
HINWEISE
AUF
DIE
MOEGLICHE
FUNKTION
DIESER
LOCI
.
77
2.
SORDARIA
MACROSPORA
BIETET
AUSGEHEND
VON
ENTWICKLUNGSMUTANTEN
VER
SCHIEDENE
MOEGLICHKEITEN
ZUR
GENISOLIERUNG
.
79
2.1
DIE
GENKARTIERUNG
MIT
HILFE
MOLEKULARER
CHROMOSOMEN
MARKER
STELLT
EINE
ALTERNATIVE
ZUR
RFLP-KARTIERUNG
DAR
.
79
2.2
DERPROF-LOCUS
WEIST
EINE
KOPPLUNG
ZUR
MARKE
R4
AUF
.
81
2.3
DIE
KOMPLEMENTATIONSTRANSFORMATION
MIT
DEN
KLONEN
EINER
COSMID-BANK
ERMOEGLICHT
DIE
ISOLIERUNG
VON
ENTWICKLUNGS
GENEN
IN
S.
MACROSPORA
.
83
3.
DAS
SDRL-GEN
KODIERT
FUER
EIN
REGULATORISCHES
PROTEIN
MIT
ESSENTIELLEN
FUNKTIONEN
IN
DER
FRUCHTKOERPERDIFFERENZIERUNG
.
85
3.1
DAS
SDRL-GEN
WEIST
STRUKTURELLE
AEHNLICHKEITEN
ZU
BEKANNTEN
KERNGENEN
AUS
SORDARIA
MACROSPORA
AUF
.
85
3.2
DAS
SDRL-GEN
IST
IN
DER
PROL-MUTANTE
VOLLSTAENDIG
DELETIERT
.
88
3.3
DAS
SDRL-PROTEIN
ENTHAELT
IM
AMINOTERMINUS
EINE
ESSENTIELLE
REGION,
DIE
EINEN
BEREICH
MIT
HOMOLOGIEN
ZUR
ZN(II)
2
CYS
6
-
DNA-BINDEDOMAENE
PILZLICHER
REGULATORPROTEINE
TRAEGT
.
88
3.4
DIE
STRUKTUR
DES
SDR1-PROTEINS
ZEIGT
DEUTLICHE
UNTERSCHIEDE
ZUM
TYPISCHEN
AUFBAU
VON
C6-ZINKFINGERPROTEINEN
.
94
3.5
EINE
FEHLEXPRESSION
DES
SDRL-GENS
KOENNTE
FUER
DIE
AUSBILDUNG
ANORMAL
GESTALTETER
FRUCHTKOERPER
VERANTWORTLICH
SEIN
.
100
4.
DEM
PUTATIVEN
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
SDR1
KOMMT
EINE
MOEGLICHE
FUNKTION
ALS
ZENTRALER
REGULATOR
DER
FRUCHTKOERPERDIFFERENZIERUNG
BEI
SORDARIA
MACROSPORA
ZU
.
104
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
108
VII.
SUMMARY
.
110
VIII.
LITERATUR
.
112
IX.
ANHANG
.
138 |
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