Immunomagnetische Anreicherung, Detektion, Charakterisierung und prognostische Bedeutung einzelner Tumorzellen in hämatopoietischem Gewebe von Karzinompatienten:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
14
2.1.
Z
ELLEN
.
14
2.1.1.
ZELLINIEN
.
14
2.1.2.
AUFTAUEN
UND
EINFRIEREN
VON
ZELLINIEN
.
15
2
1.3.
PRAEPARATION
VON
MONONUKLEAREN
ZELLEN
AUS
HUMANEM
PERIPHEREM
BLUT
(PBMC)
.
15
2
1.4.
IN-VITRO-STIMULATION
VON
PBMC
MIT
PMA/IONOMYCIN
.
16
2
15.
PRAEPARATION
HAEMATOPOIETISCHER
ZELLEN
AUS
GEWEBE
VON
TUMORPATIENTEN
.
16
2.1.6.
PRAEPARATION
VON
ZELLEN
AUS
TUMORGEWEBE
.
17
2.1.7.
HERKUNFT
DER
HAEMATOPOIETISCHEN
GEWEBE
UND
DER
TUMORGEWEBE
.
17
2
2.
A
NTIKOERPER
.
18
2
2.1.
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
GEGEN
HUMANE
MOLEKUELE
.
18
2.2.2.
SEKUNDAERANTIKOERPER
.
18
2.3.
KOPPLUNG
VERSCHIEDENER
HAPTENE
UND
FLUOROCHROME
AN
ANTIKOERPER
.
19
2.3.1.
KOPPLUNG
VON
BIOTIN
.
19
2
3.2.
KOPPLUNG
VON
FLUORESZEIN-ISOTHIOCYANAT
.
20
2.3.3.
KOPPLUNG
VON
CY5
.
20
2
3
4.
PHYCOERYTHRINKONJUGATE
.
21
2
4.
M
AGNETISCHE
Z
ELLSORTIERUNG
.
21
2
4.1.
ANREICHERUNG
VON
ZYTOKERATIN
8-POSITIVEN
ZELLEN
.
21
2.4.2.
ANREICHERUNG
VON
EP-CAM-POSITIVEN
ZELLEN
AUS
BLUT
.
22
2.5.
I
MMUNFLUORESZENZFARBUNGEN
.
22
2.5.1.
OBERFLAECHENFAERBUNG
VON
MOLEKUELEN
AUF
LEBENDEN
ZELLEN
.
23
2
5.2.
SENSITIVE
FAERBUNG
VON
OBERFLAECHENMOLEKUELEN
MITTELS
EINSATZ
VON
LIPOSOMEN
.
23
2.5
3.
INHIBITION
DER
FASL-FAERBUNG
MIT
REKOMBINANTEM
FASL-PROTEIN
.
23
2
5.4.
INTRAZELLULAERE
FAERBUNG
VON
MOLEKUELEN
IN
FIXIERTEN
ZELLEN
.
24
2.5.5.
MARKIERUNG
DER
ZELLINIE
293T
MIT
EINEM
LIPOPHILEN
CY5-TRACER
.
24
2.6.
I
MMUNFLUORESZENZANALYSEN
.
24
2.6.1.
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
24
2.6.2.
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
25
2.7.
I
MMUNZYTOCHEMIE
.
26
2.7.1.
DETEKTION
DER
ZYTOKERATIN
8-POSITIVEN
ZELLEN
NACH
ANREICHERUNG
ZYTOKERATIN
8-POSITIVER
ZELLEN
.
26
2.7.2.
DETEKTION
DER
ZYTOKERATIN
8-POSITIVEN
ZELLEN
NACH
ANREICHERUNG
EP-CAM-
POSITIVER
ZELLEN
.
26
2.8.
B
ESTIMMUNG
DER
Z
ELLZAHL
EINER
ANALYSIERTEN
P
ROBE
.
27
2
8.1
BESTIMMUNG
DER
ZAHL
DER
ZYTOKERATIN
8-POSITIVEN
ZELLEN
EINER
ANALYSIERTEN
PROBE
DURCH
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
27
2.8.2.
BERECHNUNG
DER
ZELLZAHL
DER
ANALYSIERTEN
PROBE
NACH
DURCHFLUSSZYTOMETRIE27
2.8.3.
BESTIMMUNG
DER
ZAHL
DER
ZYTOKERATIN
8-POSITIVEN
ZELLEN
EINER
ANALYSIERTEN
PROBE
DURCH
MIKROSKOPIE
.
27
2.9.
G
EWINNUNG
UND
R
EINIGUNG
DES
MONOKLONALEN
A
NTIKOERPERS
W6-32
.
28
2.10.
T
RANSFORMATION
VON
B
AKTERIEN
UND
G
EWINNUNG
VON
P
LASMID
-DNA
.
29
2.11.
DNA-K
ONZENTRATIONSBESTIMMUNG
.
29
2.12.
R
ESTRIKTIONSKONTROLLE
DER
P
LASMID
-P
RAEPARATION
.
30
2.13.
T
RANSIENTE
T
RANSFEKTION
DES
P
LASMIDS
PCDNA3/PL217
IN
293T-Z
ELLEN
.
.
30
3.
ERGEBNISSE
.
31
3.1.
M
ETHODEN
DER
T
UMORZELLANREICHERUNG
AUS
HAEMATOPOIETISCHEM
G
EWEBE
.
31
3.1.1.
ANREICHERUNG
VON
KARZINOMZELLEN
DURCH
ZYTOKERATIN
8-MARKIERUNG
.
34
3.1.2.
ANREICHERUNG
VON
TUMORZELLEN
DURCH
MARKIERUNG
DES
OBERFLAECHENMOLEKUELS
EP-CAM
.
40
3.1.3.
ANREICHERUNG
VON
TUMORZELLEN
AUS
LEUKAPHERESEMATERIAL
VON
BRUSTKREBSPATIENTEN
.
43
3
2.
A
NREICHERUNG
VON
T
UMORZELLEN
AUS
B
LUT
VON
K
ARZINOMPATIENTEN
.
45
3
3
N
ACHUNTERSUCHUNGEN
.
47
3
4
P
HAENOTYPISCHE
C
HARAKTERISIERUNG
EINZELNER
EPITHELIALER
T
UMORZELLEN
MITTELS
3-FARBEN-IMMUNFLUORESZENZ
.
49
3.4.1.
ERBB2-FAERBUNG
.
49
3.4.2.
MUZMFAERBUNG
.
51
3.4
3
CD44V6-FAERBUNG
.
51
3
5.
F
AS
L-I
MMUNFLUORESZENZ
.
53
3
5
1.
INTRAZELLULAERE
FAERBUNG
VON
FASL
IN
FASL-TRANSFIZIERTEN
ZELLEN
.
53
3.5.2.
INTRAZELLULAERE
FAERBUNG
VON
FASL
IN
ZELLEN
VON
PRIMAERKARZINOMEN
.
55
3.5.3.
FASL-LMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
AUF
DER
ZELLOBERFLAECHE
MIT
FLUORESZIERENDEN
LIPOSOMEN
.
57
3.5.4.
INHIBITION
DER
FASL-FAERBUNG
MIT
REKOMBINANTEM
FASL-PROTEIN
.
60
3.5.5.
OBERFLAECHENFAERBUNG
VON
FASL
MIT
FLUORESZIERENDEN
LIPOSOMEN
VON
PRIMAERTUMORZELLEN
.
61
3.6.
A
NALYSE
DER
MHC1
UND
ICAM1
-E
XPRESSION
IN
K
ARZINOMEN
.
66
4.
DISKUSSION
.
69
41
M
ETHODEN
DER
T
UMORZELLANREICHERUNG
.
69
4.1.1.
ENTWICKLUNG
VON
ANREICHERUNGSMETHODEN
FUER
EPITHELIALE
TUMORZELLEN
.
69
4
1
2.
VERGLEICHENDE
BETRACHTUNG
DER
ANREICHERUNG
ZYTOKERATIN
8
UND
EP-CAM-
POSITIVER
ZELLEN
.
70
4
1.3
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
ANREICHERUNGSSYSTEME
FUER
EPITHELIALE
ZELLEN
.
73
4.2.
A
NREICHERPUNG
Z
YTOKERATIN
8
POSITIVER
Z
ELLEN
AUS
B
LUT
VON
K
ARZINOMPATIENTEN
.
76
4.2.1.
ERHOEHUNG
DER
SENSITIVITAET
DER
TUMORZELLDETEKTION
IN
PATIENTENBLUT
DURCH
MACS-ANREICHERUNG
.
76
4.2.2.
URSPRUNG
DER
IM
BLUT
ZIRKULIERENDEN
EPITHELIALEN
ZELLEN
IST
DAS
KARZINOM
.
78
4
3.
K
LINISCHE
R
ELEVANZ
DER
T
UMORZELLDETEKTION
IM
B
LUT
.
79
4.3.1.
VERFUEGBARKEIT
DER
KLINISCHEN
PROBEN,
AUSWAHL
UND
KRANKHEITSVERLAUF
DER
KARZINOMPATIENTEN
.
79
4
3
2.
TUMORZELLANREICHERUNG
UND
-DETEKTION
IN
KNOCHENMARKASPIRATEN,
BLUT
UND
STAMMZELLTRANSPLANTATEN:
EIN
AUSBLICK
.
81
4.4.
F
AS
L-,
ICAM1
UND
MHC1
-E
XPRESSION
VON
K
ARZINOMZELLEN
.
83
4.4.1.
ICAM1
UND
MHC1-EXPRESSION
IN
KARZINOMEN
.
84
4.4.2.
DER
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
NOK1
FAERBT
FASL
SPEZIFISCH
AN
.
85
4.4.3.
FASL-EXPRESSION
IN
KARZINOMZELLEN?
.
86
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
93
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
95 |
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| spelling | Martin, Verena M. 1968- Verfasser (DE-588)120880245 aut Immunomagnetische Anreicherung, Detektion, Charakterisierung und prognostische Bedeutung einzelner Tumorzellen in hämatopoietischem Gewebe von Karzinompatienten vorgelegt von Verena M. Martin 1998 104 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Köln, Univ., Diss., 1998 Immunreaktion (DE-588)4133841-8 gnd rswk-swf Tumorzelle (DE-588)4186433-5 gnd rswk-swf Genexpression (DE-588)4020136-3 gnd rswk-swf Blutbildendes Gewebe (DE-588)4239650-5 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Blutbildendes Gewebe (DE-588)4239650-5 s Tumorzelle (DE-588)4186433-5 s DE-604 Immunreaktion (DE-588)4133841-8 s Genexpression (DE-588)4020136-3 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008519862&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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