Modulation der Immunantwort von Colon Lamina Propria Fibroblasten durch IL-22 bei Morbus Crohn:
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS 8
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 12
1 EINLEITUNG 1 4
1.1 AUFBAU DER DARMWAND 14
1.2 MORBUS CROHN - EIN UEBERBLICK 15
1.2.1 HISTORISCHER RUECKBLICK 15
1.2.2 INZIDENZ 16
1.2.3 KLINISCHE MERKMALE 17
1.2.4 KRANKHEITSVERLAUF 18
1.2.5 AETIOLOGIE 19
1.2.5.1 HYPOTHESE DER INFEKTIOESEN GENESE 19
1.2.5.2 GENETISCHE FAKTOREN 20
1.3 DIE ROLLE DES INTERLEUKIN 22 22
1.4 IL-22 UND MORBUS CROHN 25
1.5 ZIEL DER ARBEIT 26
2 MATERIALIEN 2 7
2.1 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 27
2.2 ZELLKULTUR 28
2.3 ELISA 28
2.3.1 ANTIKOERPER 29
2.4 WESTERN BLOTTING 29
8
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IMAGE 2
2.4.1 ANTIKOERPER 30
2.5 TAQMAN 30
2.6 SONSTIGE VERBRAUCHSMATERIALIEN 32
2.7 LABORAUSSTATTUNG, GERAETE 32
2.8 INTERLEUKINE 34
2.9 SOFTWARE 34
2.10 NAEHRMEDIEN, PUFFER UND LOESUNGEN 35
2.10.1 NAEHRMEDIEN 35
2.10.2 ALLGEMEINE PUFFER 36
3 METHODEN 3 8
3.1 ISOLIERUNG, LAGERUNG UND KULTIVIERUNG VON CLPF 38
3.2 STIMULATION DER CLPF MIT IL-22, TNF-A UND LPS 39
3.3 WESTERN BLOTTING 40
3.4 ELISA 44
3.5 RNA-ISOLATION 45
3.6 REVERSE TRANSKRIPTASE 47
3.7 TAQMAN-PCR 47
4 ERGEBNISSE 5 1
4.1 UNTERSUCHUNG HUMANER CLPF AUF DEREN IL-22-REZEPTOR STATUS 51
4.2 DER EINFLUSS VON IL-22 AUF DIE SEKRETION PROINFLAMMATORISCHER
ZYTOKINE BEI CLPF 52
4.2.1 UNTERSUCHUNGEN ZUM DOSIS-WIRKUNGSEFFEKT 52
4.2.1.1 UNTERSUCHUNGEN AN CLPF AUS NICHT ENTZUENDLICHEN KONTROLLEN
(KO-CLPF) 52
4.2.1.2 UNTERSUCHUNGEN AN CLPF AUS STENOSEFREIEN DARMABSCHNITTEN VON
MORBUS-CROHNPATIENTEN (MC-CLPF) 54
9
IMAGE 3
4.2.1.3 UNTERSUCHUNGEN AN CLPF AUS STENOSIERTEN DARMABSCHNITTEN VON
MORBUS-CROHN-
PATIENTEN (ST-CLPF) 56
4.2.2 STIMULATION DER KONTROLL-CLPF MIT IL-22 UND LPS 58
4.2.3 ZUSAMMENFASSUNG DER BISHERIGEN ERGEBNISSE 60
4.2.4 VERGLEICH DER IL-6- UND IL-8-PRODUKTION VON KONTROLL-, MC-, ST-
UND LPS-KOSTIMULIERTEN
KONTROLL-CLPF BEI STIMULATION MIT 25 NG/ML IL-22 60
4.2.5 ZEITLICHER VERLAUF DER IL-6- UND IL-8-ANTWORT BEI KONTROLL-CLPF 62
4.2.5.1 ZEITLICHER VERLAUF BIS ACHT STUNDEN 62
4.2.5.2 ZEITLICHER VERLAUF BIS 24 STUNDEN 63
4.2.5.3 ZEITLICHER VERLAUF ZWISCHEN ACHT UND 48 STUNDEN 64
4.2.6 ZEITLICHER VERLAUF BEI DEN LPS-KOSTIMULIERTEN KONTROLL-CLPF 65
4.3 UEBERPRUEFUNG DER INDUKTION VON PSTAH, STAT3, PSTAT3 UND PSTAT5 66
4.4 FIBROSEPARAMETER 66
4.4.1 ST-CLPF 66
4.4.1.1 CTGF 66
4.4.1.2 COLLAGEN I 67
4.4.2 MC-CLPF 68
4.4.2.1 CTGF 68
4.4.2.2 COLLAGEN I 69
5 DISKUSSION 7 1
6 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 7 6
7 LITERATURVERZEICHNIS 7 8
8 DANKSAGUNG 9 2
9 CURRICULUM VITAE 93
10
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