Eine neue Methode zur Bestimmung von gesamtem und direktem Bilirubin:
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Veröffentlicht: |
2005
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Beschreibung: | Tübingen, Univ., Diss., 2005 (Nur beschränkt für den Austausch) |
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 5
2. Bilirubin-Fraktionen und Isomere 7
2.1. Unkonjugiertes Bilirubin 8
2.2. Konjugiertes Bilirubin/Bilirubin-Glucuronide 12
2.3. S-Bilirubin 15
3. Der Stoffwechsel des Bilirubins 16
4. Methoden der Bilirubinbestimmung 19
4.1. Nasschemische Bestimmung von Gesamtbilirubin 19
4.1.1. Kupplung mit Diazoniumsalzen 19
4.1.1.1. Malloy-Evelyn-Methode 20
4.1.1.2. Jendrassik-Grof-Meihode 21
4.1.1.3. „Candidate Reference Method 22
4.1.1.4. 2,5-Dichlorodiazonium (DPD)-Methode 27
4.1.1.5. Andere Diazomethoden 28
4.1.2. Enzymatische Oxidation mit Bilirubin-Oxidase 29
4.2. Direkte Spektrophotometrie 30
4.2.1. Methode von Hertz, Dybkaerund Lauritzen 31
4.2.2. Methode von Vink 33
4.3. Methoden mit trägergebundenen Reagenzien 34
4.3.1. Vitros 250: Bestimmung des Gesamtbilirubins nach dem
Diazo-Verfahren (TBIL-Slide) 35
4.3.2. Vitros 250: Bestimmung des unkonjugierten und
konjugierten Bilirubins mit Hilfe der direkten
Spektrophotometrie (BuBc-Slide) 36
2
4.4. Chromatographische Methoden zur Trennung von
Bilirubinfraktionen 38
4.4.1. Trennung nach Lauft 39
4.4.2. Alkalische Methanolyse nach Blankaert 40
4.4.3. Methode von Adachi 41
4.5. Bestimmung von direktem bzw. konjugiertem Bilirubin 43
4.5.1. Bestimmung von direktem Bilirubin durch Reaktion mit
Diazoniumsalzen 43
4.5.1.1. Bestimmung von direktem Bilirubin nach Poon 44
4.5.1.2. Methode von Doumas 44
4.5.2. Bestimmung des direkten Bilirubins mit Hilfe der Bilirubin-
Oxidase 45
4.5.3. Bestimmung von konjugiertem und Berechnung von
„direktem Bilirubin mit trägergebundenen Reagenzien 45
5. Material und Methoden 46
5.1. Kontroll-und Ringversuchsseren 46
5.2. Humane Poolseren 47
5.3. Serumproben für den Methodenvergleich 47
5.4. Bestimmung von Gesamtbilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Testmethode) 48
5.5. Bestimmung von direktem Bilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Testmethode) 49
5.6. Bestimmung von Gesamtbilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Vergleichsmethode) 50
5.7. Bestimmung von direktem Bilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Vergleichsmethode) 51
3
5.8. Bestimmung von Gesamtbilirubin mit dem TBIL-Slide
und unkonjugiertem bzw. konjugiertem Bilirubin mit
dem BuBc-Slide am Analysenautomaten Vitros 250
(Vergleichsmethode) 52
5.9. Bestimmung von Gesamtbilirubin in Kontrollseren
und humanen Serumpools mit der
„Candidate Reference Methoct 52
5.10. Statistik 52
6. Ergebnisse 53
6.1. Präzision in der Serie 54
6.2. Präzision von Tag zu Tag 55
6.3. Wiederfindung in Kontrollproben 56
6.4. Wiederfindung in humanen Poolseren 57
6.5. Ergebnisse des Methodenvergleichs
mit Erwachsenenproben 60
6.6. Ergebnisse des Methodenvergleichs
mit Neugeborenenproben 66
7. Diskussion 70
8. Zusammenfassung 80
Literaturverzeichnis 82
Danksagung
Lebenslauf
4
|
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 5
2. Bilirubin-Fraktionen und Isomere 7
2.1. Unkonjugiertes Bilirubin 8
2.2. Konjugiertes Bilirubin/Bilirubin-Glucuronide 12
2.3. S-Bilirubin 15
3. Der Stoffwechsel des Bilirubins 16
4. Methoden der Bilirubinbestimmung 19
4.1. Nasschemische Bestimmung von Gesamtbilirubin 19
4.1.1. Kupplung mit Diazoniumsalzen 19
4.1.1.1. Malloy-Evelyn-Methode 20
4.1.1.2. Jendrassik-Grof-Meihode 21
4.1.1.3. „Candidate Reference Method 22
4.1.1.4. 2,5-Dichlorodiazonium (DPD)-Methode 27
4.1.1.5. Andere Diazomethoden 28
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4.2. Direkte Spektrophotometrie 30
4.2.1. Methode von Hertz, Dybkaerund Lauritzen 31
4.2.2. Methode von Vink 33
4.3. Methoden mit trägergebundenen Reagenzien 34
4.3.1. Vitros 250: Bestimmung des Gesamtbilirubins nach dem
Diazo-Verfahren (TBIL-Slide) 35
4.3.2. Vitros 250: Bestimmung des unkonjugierten und
konjugierten Bilirubins mit Hilfe der direkten
Spektrophotometrie (BuBc-Slide) 36
2
4.4. Chromatographische Methoden zur Trennung von
Bilirubinfraktionen 38
4.4.1. Trennung nach Lauft 39
4.4.2. Alkalische Methanolyse nach Blankaert 40
4.4.3. Methode von Adachi 41
4.5. Bestimmung von direktem bzw. konjugiertem Bilirubin 43
4.5.1. Bestimmung von direktem Bilirubin durch Reaktion mit
Diazoniumsalzen 43
4.5.1.1. Bestimmung von direktem Bilirubin nach Poon 44
4.5.1.2. Methode von Doumas 44
4.5.2. Bestimmung des direkten Bilirubins mit Hilfe der Bilirubin-
Oxidase 45
4.5.3. Bestimmung von konjugiertem und Berechnung von
„direktem" Bilirubin mit trägergebundenen Reagenzien 45
5. Material und Methoden 46
5.1. Kontroll-und Ringversuchsseren 46
5.2. Humane Poolseren 47
5.3. Serumproben für den Methodenvergleich 47
5.4. Bestimmung von Gesamtbilirubin am Analysenautomaten
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5.5. Bestimmung von direktem Bilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Testmethode) 49
5.6. Bestimmung von Gesamtbilirubin am Analysenautomaten
Hitachi 911 (Vergleichsmethode) 50
5.7. Bestimmung von direktem Bilirubin am Analysenautomaten
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3
5.8. Bestimmung von Gesamtbilirubin mit dem TBIL-Slide
und unkonjugiertem bzw. konjugiertem Bilirubin mit
dem BuBc-Slide am Analysenautomaten Vitros 250
(Vergleichsmethode) 52
5.9. Bestimmung von Gesamtbilirubin in Kontrollseren
und humanen Serumpools mit der
„Candidate Reference Methoct 52
5.10. Statistik 52
6. Ergebnisse 53
6.1. Präzision in der Serie 54
6.2. Präzision von Tag zu Tag 55
6.3. Wiederfindung in Kontrollproben 56
6.4. Wiederfindung in humanen Poolseren 57
6.5. Ergebnisse des Methodenvergleichs
mit Erwachsenenproben 60
6.6. Ergebnisse des Methodenvergleichs
mit Neugeborenenproben 66
7. Diskussion 70
8. Zusammenfassung 80
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