Extraktion mikrovaskulärer Endothelzellen aus humanem Fettgewebe: Entwicklung und Vergleich verschiedener Methodiken
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2000
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EXTRAKTION
MIKROVASKULAERER
ENDOTHELZELLEN
AUS
HUMANEM
FETTGEWEBE
-
ENTWICKLUNG
UND
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
METHODIKEN
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
5
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
2.1.
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
8
2.2.
MATERIALGEWINNUNG
UND
FETTGEWEBSVERARBEITUNG
9
2.3.
ENDOTHELZELLGEWINNUNG
MITTELS
DICHTESEDIMENTATION
12
2.4.
ENDOTHELZELLGEWINNUNG
MITTELS
PERCOLL
UND
ULTRAZENTRIFUGATION
13
2.5.
ENDOTHELZELLGEWINNUNG
MITTELS
PERCOLL
UND
ULTRAZENTRIFUGATION
UND
14
ANSCHLIESSENDER
SUBKULTIVIERUNG
2.6.
EXTRAKTION
VON
ENDOTHELZELLEN
MITTELS
"DYNABEADS"
15
2.7.
GEWINNUNG
HUMANER
ENDOTHELZELLEN
AUS
VENEN
17
2.8.
ZELLKULTIVIERUNG
18
2.8.1.
NAEHRMEDIUM
UND
ZELLZAEHLUNG
18
2.8.2.
PASSAGIEREN
DER
KULTUREN
19
2.8.3.
BEURTEILUNG
DER
ZELLMORPHOLOGIE
21
2.9.
FAKTOR
VIII
-
BESTIMMUNG
22
2.9.1.
TEILUNGSVORGANG
22
2.9.2.
FIXATION
DER
ZELLKULTUREN
23
2.9.3.
FAERBEN
DER
ZELLKULTUREN
24
2.9.4.
BESTIMMUNG
DES
ENDOTHELZELLANTEILS
IN
DEN
KULTUREN
24
2.10.
A
-
AKTIN
-
BESTIMMUNG
27
2.10.1
.TEILUNG
DER
ZELLKULTUREN
27
2.10.2.
FIXATION
DER
ZELLKULTUREN
27
2.10.3.
FAERBEN
DER
ZELLKULTUREN
27
2.10.4.
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
GLATTER
MUSKELZELLEN
IN
DEN
28
KULTUREN
2.11.
PROSTACYCLINMESSUNG
(
PGH
)
30
2.12.
STATISTIK
33
3.
ERGEBNISSE
34
3.1.
PATIENTENKOLLEKTIV
34
3.1.1.
ALTER
UND
GESCHLECHTSVERTEILUNG
34
3.1.2.
RISIKOFAKTOREN
35
3.2.
ZELLAUSSAAT
UND
ZELLWACHSTUM
37
3.2.1.
BERECHNUNG
DER
GEWONNENEN
UND
DER
AUSGESAETEN
ZELLEN
37
3.2.2.
ZELLPROLIFERATION
39
3.2.2.1.
PARTIELLE
ZELLBESIEDELUNG
"P"
39
3.2.2.2.
ZELLVERDOPPELUNGSRATE
UND
-ZEIT
43
3.2.3.
ZELLMORPHOLOGIE
44
3.3.
IDENTIFIZIERUNG
DER
ZELLTYPEN
DURCH
IMMUNHISTOCHEMIE
51
3.3.1.
FAKTOR
VIII
-
BESTIMMUNG
51
3.3.2.
A
-
AKTIN
-
BESTIMMUNG
53
3.3.3.
ZELLANTEILE
DER
VERSCHIEDENEN
ZELLGEWINNUNGSMETHODIKEN
54
3.4
BESTIMMUNG
DES
6
-
KETO
-
PROSTAGLANDIN
FI
A
55
3.4.1.
ERMITTLUNG
DER
ENDOTHELZELLDICHTE
55
3
3.4.2.
MESSERGEBNISSE
NACH
2
H
INKUBATION
56
3.4.3.
MESSERGEBNISSE
NACH
24
H
INKUBATION
60
4.
DISKUSSION
65
4.1.
AUSWIRKUNGEN
DES
PATIENTENKOLLEKTIVS
AUF
DAS
65
ENDOTHELZELLWACHSTUM
4.2.
EINFLUSS
DER
METHODIK
AUF
DIE
ZELLAUSSAAT
66
4.3.
DIE
ENTWICKLUNG
DES
ZELLWACHSTUMS
IM
METHODIKVERGLEICH
68
4.4.
VERGLEICH
DER
ENTWICKLUNG
DER
ZELLMORPHOLOGIE
70
4.5.
VERGLEICH
DER
ZELLANTEILE
72
4.5.1.
QUANTIFIZIERUNG
DER
ENDOTHELZELLEN
DURCH
72
FAKTOR
VM
-
BESTIMMUNG
4.5.2.
QUANTIFIZIERUNG
DER
GLATTEN
MUSKELZELLEN
DURCH
75
D
-
AKTIN
BESTIMMUNG
4.5.3.
BEURTEILUNG
DER
UNTERSCHIEDLICHEN
ZELLANTEILE
76
4.6.
EINFLUSS
DER
ZELLANTEILE
AUF
DIE
STOFFWECHSELAKTIVITAET
81
4.7.
EINFLUSS
DER
GEWEBEHERKUNFT
AUF
DIE
KULTIVIERUNG
VON
87
ENDOTHELZELLEN
5.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
91
6.
ANHANG
95
6.1.
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
95
6.2.
LITERATURVERZEICHNIS
97
DANKSAGUNG
UND
LEBENSLAUF
116
4 |
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