Helicobacter-pylori-Infektion beim Rhesusaffen (Macaca mulatta): Etablierung eines Tiermodells am Deutschen Primatenzentrum
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Autor: Kunz, Emanuela
Jahr: 2000
2.12.3 Zeitpunkt des TherapIeelnsatze^ 41
2.13 TiermodellefurW. pylori 4]
2.14 Anriere Helicobacier-ispezie^ 43
2.15 Bei nicht-menschlichen Pnmaten beschriebene Helicobaaer-hpeziei- 45
3 Eigene Untersuchungen 47
3.i Material und Methoder 47
3.1.1 Therapieversuche zur Eradikation von LG1S 47
3.1.1.1 Tiermateria! 47
3.1.1.2 Therapjen zur Eradikation von LG1S 47
3.1.1.3 Versuchsaufbau Eradikationstherapier, 4k
3.1.2 H. /n-Zon-lnfektionsversud 4^
3.1.2.1 Tiermateria1 48
3.1.2.2 bxpenmemelles Design 4°
3.1.2.3 Entnahmestellen fur Burstenzytoloeie und Gewebeexzisionen 49
3.1.2.4 Baktenenmateria] 50
3.1.2.4.1 Anlesen einer Bakterienkultur 51
3.1.2.4.2 Gewinnnung von infektibser Dosis 51
3.1.2.5 Gewinnuny des bmersuchungsmateriai.1- 5T
3.1.2 5.1 tntnahme von Blutproben iZ
3.1.2.5.2 Gewinnung von Maeensafi 55
3.1.2.6 lnstrumentelie Ausstattunt 5?
3.1.2.6.1 Endoskor 5?
3.1.2 6.2 Apparative Hilfsmittel zur Probengewinnun.L 5?
3.1.2 6.3 Zubeho: 53
3.1.2.7 Lmersuchung. lnfektion und Probenentnahmt 54
3.1.2.7.1 Vorbereitune und Narkost 54
3.1.2.7.2 Lntersuchungstechnik und Gastroskopit 55
3.1.2.7.3 Applikation von H. pylori 57
3.1.2.7.4 Zaneenbiopsit 57
3.1.2.7.5 Burstenz lologit 5b
3.1.2.7 6 Gewinnung von Maeensafi 5S
3.1.2.8 Mikrobiologische Untersuchungen 59
3.1.2.8.1 BakterienkuitU! 59
3.1.2.8.2 breasetesi 59
Inhaltsverzeichnis
Abkiirzungsverzeichms
1 Einleitung 13
2 Literaturubersicht I«
2.1 Geschichtlicher Uberblick I*
2.2 Morphologie r
2.2.1 Spiralige F orm 17
2.2.2 KokkoideForm Jl-
2.2.3 Transformation von der spiraligen in die kokkoide Form
2.2.4 Zuriickbildung der spiraligen aus der kokkoiden Form 19
2.2.5 Bedeutung der kokkoiden Form 20
2.3 Biochemiscbe Eigenschaften 20
2.4 Wachsiumsbedingungen 20
2.5 Virulenzfaktoren 2)
2.5.1 Urease 21
2.5.2 Motilitat 22
2.5.3 Adharenz 23
2.5.4 Zytotoxine 2?
2.5.5 CagA (cyt otoxin-assocjaled gene A) Protein 25
256 Lipopolysaccharid(LPS) 25
2.5.7 lmmunmodulatorische Faktoren 26
2.58 Phospholipase 26
2 6 Pathogenese. Entzundung uad immunologische Reaktion 26
2.7 Epidemiologje 29
2.8 Transmissionsroulen 31
2.9 GastritiskUssiiikation. Dis modifizieite Sydney-System 31
2.10 H, pylori ak Krankbertsursache T.
2.11 Dugoostik 34
2.11.1 Invasive Metboden 35
2.11.2 Nicnt-mvasive Methoden 37
38
2 12 1 Then^rachennta..... 38
40
3.1.2.9 Lichtmikroskopische Lmtersuchurmer 6(
3.1.2.9.1 Biopsiemaieria! 6(
3.1.2.9.: Obiekttragerausstricht 6(
3 1.2.10 Jmmunhistochemische Lntersuchunger! 6)
3.1.2.11 Iransmissionselektronenmikroskopische bntersuchungen 62
3.1.2.1 II Biopsien 6:
3.] 2.11.2 Negative Staining 6?
3.1.2.12 Molekularbiologische Uniersuchunger, 63
3.1.212.1 DNA-lsolierung aus Magenbiopsien oder Reinkultureri 6?
3.1.2 12.2 Ampiifikationder I6SrDNA 64
3.12.12.3 Aufreinjgune der DNA 64
3.1.2.12.4 Sequenzier-PCR 65
3 1.2.12.5 Amomatische Sequenzierunt 65
3.1.2.12.6 Sequenzanalyst 66
3.2 Ergebnisse 67
3.2.1 Eradikationstherapie 67
3 2 2 lnfektionsversuche mit humanpathogenen H. pylori bk
3.2.2.1 Anamnestische Beftinde 6S
3.2.2.2 Expenmentelle Infektion 69
3.2.2.2 1 Endoskopische Befonderhebunt 69
3 2.2 2 2 pH-Wert-Messuna des Magensafts 69
3.2.2.2.3 Zytologische Befunde 69
3.2.2.2.4 Histologit 71
3.2.2.2.5 TEM - Ultradunnschnme 72
3.2.2.2.6 TEM - Negative Staining 72
3.2.2.2.7 Mikrobiologit 73
3.2.2.2.8 Molek-ularbiologK 74
3.2.2.3 Probenauswertung des Kontrollmaterial? 74
Diskussion 85
4.1 Rhesusaffe als Modelltiei 85
4 2 Therapeutrsche Eradikationsversuche der LG1S 87
4.3 Vjnterschiedliche lnfektiositat der inokulierten H. pvfon-Stammt 8^
4 4 Aussaeekraft des Untersuchunesmaterial.« 89
Inhaltsverzeichnis
Abkurzungsverzeichniy
1 Einleitung 1?
2 Literaturubersicht l*
2.1 Geschichtiicher Uberblick 1
2.2 Morphologie 1
2.2.1 Spiralige form J~
2.2.2 Kokkoide Form If-
2.2.3 Transformation von der spiraligen in die kokkoide Form IV
2.2.4 Zuriickbildung der spiraJigen aus der kokkoiden horm 19
2.2.5 Bedeutung der kokkoiden Form 20
2.3 Biochemische Eigenschafien 20
2.4 Wachstumsbedmgungen 20
2.5 Virulenzfakioren 21
2.5.1 Urease 21
2.5.2 MotiJital 22
2.5.3 Adharenz 23
2.5.4 Zytotoxine 2?
2.5.5 CagA (cytotoxin-associated gene A) Protein 25
2 5.6 lipopolysaccharid (LPS) 25
2.5.7 lmmunmodulatoriscbe Faktoren 2t
2.5.8 Phospholipase 2t
2.6 Pathogenese, Enlziindung und immunoiogjsche Reaktion 26
2.7 Epidemiologie 29
2.8 Iransmissionsrouten 31
2.9 GastritiskUssifikation: Das modiiizierte Sydney-System 31
2 10 //. py/on als Krankhertsursache 3:
2.11 Dagnostik 34
2 11.1 Invisive Metboden 35
2.112 Nicht-mv»s!ve Metboden 37
2 12. ThcrapK 38
2.12.J Ther«p«eschein»u 38
2.J2.2 TherapievergJgeii 40
4.4] Ureasetesi 8°
4.4.2 Biopsier, 89
4.4.3 Magensafi 91
Zusammenfassung 9?
Summary 9
Literaturverzeichnis 9
Anhang lit-
8.] Protokolle fur die Mikrobiologif 1U
8 2 Protokoll der Paraplast-Einbettung (Hypercenter XP) 119
8 3 Protokolle fur die Histologie und Elektronenmikroskopie ]2(
8 4 Protokolle fur die lmmunhistochemie OCHi 12^
8.5 Losungen fur die Molekularbioiogit 12
8.6 Abbildungsverzeichnis 12
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