Antiangiogene Untersuchungen im Pankreaskarzinom-Mausmodell zur Wirksamkeit von Vitamin C und Gemcitabin:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Marburg
2017
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
TABELLENVERZEICHNIS..........................................................................................................
6
ABBILDUNGSVERZEICHNIS......................................................................................................7
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS....................................................................................................
9
1
EINLEITUNG...................................................................................................................10
1.1
PANKREAS..............................................................................................................10
1.2
PANKREASKARZINOM...............................................................................................11
1.2.1
AETIOLOGIE.................................................................................................11
1.2.2
SYMPTOME................................................................................................13
1.2.3
DIAGNOSTIK................................................................................................13
1.2.4
TNM-KLASSIFIKATION................................................................................14
1.2.5
THERAPIE...................................................................................................15
1.3
ANGIOGENESE......................................................................................................
20
1.4
PRUEFSUBSTANZEN...................................................................................................
24
1.4.1
GEMCITABIN..............................................................................................
24
1.4.2 VITAMIN C
...............................................................................................
25
1.5
ZIELSETZUNG.........................................................................................................
26
2
MATERIALIEN................................................................................................................
28
2.1
GERAETE.................................................................................................................
28
2.2
ZELLKULTUR...........................................................................................................
28
2.2.1 ZUBEHOER FUER
PROLIFERATIONSASSAYS...........................................................
28
2.2.2
ZELLEN......................................................................................................
29
2.2.3
PRUEFSUBSTANZEN........................................................................................
29
2.2.4 ZUBEHOER FUER
TIERVERSUCH.........................................................................
29
2.3
IMMUNHISTOCHEMIE............................................................................................
29
2.3.1 ZUBEHOER FUER IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNGEN
......................................
29
2.3.2
ANTIKOERPER...............................................................................................
30
2.3.3 REAGENZIEN FUER IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNGEN
.................................
30
2.4
COMPUTERPROGRAMME.........................................................................................
31
3
METHODEN..................................................................................................................
32
3.1 ZELLKULTUR DER
IN-VITRO-VERSUCHE.....................................................................
32
3.1.1 VERWENDETE
ZELLEN..................................................................................
32
3.1.2 ZELL
WACHSTUM..........................................................................................
32
3.1.3
ZELLVERSORGUNG........................................................................................
32
3.1.4
ZELLAUSSAAT..............................................................................................
33
3.1.5
ZELLZAEHLUNG.............................................................................................
36
3.1.6 BERECHNUNGEN UND ZELLZAHLEINSTELLUNG
..................................................
36
3.1.7
PROLIFERATIONSASSAY............................................................
38
3.1.8 MEDIUM WECHSEL DER PRUEFSUBSTANZEN
......................................................
39
3.1.9 MEDIUM WECHSEL DER
KOMBINATIONSVERSUCHE..........................................41
3.1.10 MEDIUMWECHSEL DER
ENDOTHELZELLEN....................................................... 42
3.2 ZELLKULTUR DER
IN-VIVO-VERSUCHE........................................................................
42
3.2.1 ABLAUF DES
TIERVERSUCHES.......................................................................
43
3.2.2
IMPLANTATION............................................................................................
44
3.2.3 DOSIERUNG DER PRUEFSUBSTANZEN UND
THERAPIESCHEMA..............................46
3.2.4 BEENDEN DES
TIERVERSUCHES....................................................................
47
3.3
IMMUNHISTOCHEMIE............................................................................................
47
3.3.1
H.E.-FAERBUNG..........................................................................................
48
3.3.2
KI-67-FAERBUNG........................................................................................
49
3.3.3
CD-31-FAERBUNG.......................................................................................
52
3.3.4
TUNEL-FAERBUNG....................................................................................
54
4
ERGEBNISSE.................................................................................................................
58
4.1
PROLIFERATIONSASSAYS...........................................................................................
58
4.1.1
GEMCITABIN..............................................................................................
59
4.1.2 VITAMIN C
...............................................................................................
62
4.1.3 KOMBINATION VON VITAMIN C UND GEMCITABIN
.......................................
66
4.1.4 ZEITLICH UNTERSCHIEDLICHE WIRKSAMKEIT VON VITAMIN C
.........................
68
4.2 AUSWERTUNG DES TIERVERSUCHES
..........................................................................
69
4.3
IMMUNHISTOCHEMIE............................................................................................
71
4.3.1 AUSWERTUNG DER H.E.-FAERBUNG
...............................................................
71
4.3.2 AUSWERTUNG DER CD-31 -FAERBUNG
...........................................................
72
4.3.3 AUSWERTUNG DER
KI-67-FAERBUNG..............................................................
75
4.3.4 AUSWERTUNG DER TUNEL-FAERBUNG
..........................................................
80
4.3.5 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN
FAERBUNGEN...............................................................................................
83
5 DISKUSSION
.....
.
..........................................................................................................84
5.1
PROLIFERATIONSASSAYS.........................................................................................
84
5.1.1 PROLIFERATIONSASSAYS MIT VITAMIN C
........................................................84
5.1.2 PROLIFERATIONSASSAYS MIT
GEMCITABIN...................................................... 85
5.1.3 PROLIFERATIONSASSAYS MIT KOMBINATION VON GEMCITABIN UND
VITAMIN C
...............................................................................................
86
5.1.4 ZEITABHAENGIGKEIT FUER DEN MEDIUM WECHSEL VON VITAMIN C
....................
87
5.2
TIERVERSUCH........................................................................................................
87
5.2.1 DISKUSSION DES
TIERVERSUCHES.................................................................
87
5.2.2 DISKUSSION DES
TUMORMODELLS................................................................
88
5.3
IMMUNHISTOCHEMIE............................................................................................
90
5.3.1 NACHWEIS DER MIKROGEFASSDICHTE (CD-31 -FAERBUNG)
...............................
90
5.3.2 PROLIFERATIONSNACHWEIS
(KI-67-FAERBUNG)................................................ 91
5.3.3 APOPTOSENACHWEIS
(TUNEL-FAERBUNG)...................................................92
5.4 SCHLUSSFOLGERUNG FUER VITAMIN C
........................................................................
93
6 ZUSAMMENFASSUNG/S
UMMARY....................................................................................
95
6.1
ZUSAMMENFASSUNG.............................................................................................
95
6.2
SUMMAIY............................................................................................................
97
7
LITERATURVERZEICHNIS................................................................................................
100
ANHANG..........................................................................................................................114
VERZEICHNIS DER AKADEMISCHEN LEHRER
....................................................................
114
DANKSAGUNG.............................................................................................................115
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