Entwicklung eines direkten heterogen kompetitiven Enzymimmunoassays für das Antidepressivum (R,S)-Fluoxetin:
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| adam_text | 4-SS1 - PHARMAZEUTISCHE CHEMIE ENTWICKLUNG EINES DIREKTEN HETEROGEN
KOMPETITIVEN ENZYMIMMUNOASSAYS FUER DAS ANTIDEPRESSIVUM (R,S)-FLUOXETIN
INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER
NATURWISSENSCHAFTEN IM FACHBEREICH CHEMIE UND PHARMAZIE DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET DER WESTFAELISCHEN
WILHELMS-UNIVERSITAET MUENSTER VORGELEGT VON SUSANNE KRAICZEK AUS
KIRCHHELLEN -1998- INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS THEORETISCHER
TEIL 1 EINLEITUNG 1 1.1 DEPRESSIVE ERKRANKUNGEN UND DEREN BEHANDLUNG 1
1.2 (R, S)-FLUOXETIN 2 1.2.1 CHEMISCHE KLASSIFIKATION 2 1.2.2
FLUOXETINSYNTHESE 3 1.2.3 SUBSTANZEIGENSCHAFTEN 4 1.2.4 WIRKMECHANISMUS
5 1.2.5 BIOPHARMAZEUTISCHES PROFIL 5 1.2.5.1 PHARMAKOKINETIK 5 1.2.5.2
METABOLISIERUNG 6 1.2.5.3 NEBENWIRKUNGEN UND TOXIKOLOGIE 6 2
PROBLEMSTELLUNG 7 3 DIE ENZYMIMMUNOASSAY - TECHNIK 10 3.1 HISTORISCHE
ASPEKTE 10 3.2 PRINZIP DES ENZYMIMMUNOASSAYS 11 3.3 EINTEILUNG DER
ENZYMIMMUNOASSAYS 12 3.4 ENZYMIMMUNCHEMISCHE BESTIMMUNGSMETHODEN 13 3.5
DER HETEROGEN KOMPETITIVE EIA MIT ENZYMGEKOPPELTEM ANTIGEN 14
INHALTSVERZEICHNIS II 4 AUSWERTUNGSMETHODEN FUER ENZYMIMMUNOASSAYS 15 4.1
NORMIERUNG DER DATEN 15 4.2 KURVENANPASSUNG 16 5 ORGANISCH -
PRAEPARATIVER TEIL 1 18 5.1 GRUNDUEBERLEGUNGEN ZUR HERSTELLUNG EINES
IMMUNISIERUNGSANTIGENS MIT FLUOXETIN ALS DETERMINANTER STRUKTUR 18 5.2
SYNTHESE KOPPLUNGSFAEHIGER FLUOXETINDERIVATE 20 5.2.1 SYNTHESE VON
N-(3-CARBOXYPROPIONYL)-FLUOXETIN (F.-SUCC.) 21 5.2.2 SYNTHESE VON
N-(2-CARBOXYETHYL)-FLUOXETIN (F.-SPAC.) 21 5.3 KOPPLUNG VON
N-(3-CARBOXYPROPIONYL)-FLUOXETIN AN BSA 22 5.3.1 RINDERSERUMALBUMIN 22
5.3.2 METHODE DER WASSERLOESLICHEN CARBODIIMIDE 23 5.4 AUFARBEITUNG DES
VOLLANTIGENS 25 6 ANALYTIK DES VOLLANTIGENS 1 26 6.1 BESTIMMUNG DER
ANBINDUNGSRATE 26 6.2 UV-SPEKTOSKOPISCHE ANALYTIK DES VOLLANTIGENS 27 7
IMMUNOLOGISCHER TEIL 29 7.1 IMMUNOLOGISCHE GRUNDLAGEN 29 7.1.1 DAS
IMMUNSYSTEM 29 7.1.2 DER ANTIKOERPER 29 7.1.3 DIE PRODUKTION VON
ANTIKOERPERN 31 7.2 IMMUNISIERUNG 33 7.2.1 WAHL DES TIERES 33 7.2.2 DIE
HERSTELLUNG POLYKLONALER ANTIKOERPER 34 INHALTSVERZEICHNIS III 8
IMMUNCHEMISCHER BEREICH 37 8.1 AGARGEL-DOPPELDIFFUSION NACH OUCHTERLONY
37 8.1.1 PRUEFUNG AUF IDENTITAETS-/TEILIDENTITAETSREAKTIVITAET 38 8.1.2
TITRATION EINER ANTIGEN- BZW. KONJUGATLOESUNG 40 8.1.3 TITRATION EINER
BSA-LOESUNG 40 8.1.4 AUSTESTUNG DER ABSORPTION MIT BSA 41 8.2 BESTIMMUNG
DES PROTEINGEHALTES DER ANTISERA NACH BRADFORD 41 8.3 ISOLIERUNG DER
Y-GLOBULINFRAKTION 42 9 ORGANISCH - PRAEPARATIVER TEIL II 44 9.1 AUSWAHL
EINES MARKERENZYMS 44 9.1.1 MEERRETTICHPEROEXIDASE (POD, EC 1.11.1.7) 45
9.2 AUSWAHL EINES GEEIGNETEN SUBSTRAT-/CHROMOGENSYSTEMS 46 9.3 SYNTHESE
VON FLUOXETIN-POD-KONJUGATEN 48 9.3.1 METHODE DER GEMISCHTEN ANHYDRIDE
49 9.4 CHARAKTERISIERUNG DER FLUOXETIN-POD-KONJUGATE 51 9.4.1 BESTIMMUNG
DERANBINDUNGSRATEN 51 10 AUFBAU UND OPTIMIERUNG DES FLUOXETIN - ELISA 53
10.1 ERMITTLUNG OPTIMALER ANTIKOERPER- UND ENZYMKONJUGAT-KONZENTRATIONEN
53 10.2 SCREENING DER VERSCHIEDENEN ANTISEREN 55 10.3 ERMITTLUNG DER
GUENSTIGSTEN COATINGZEIT UND -TEMPERATUR 56 10.4 ERMITTLUNG DER BESTEN
ANTIGEN-ANTIKOERPER-REAKTIONSZEIT 57 10.5 ERSTELLUNG DER
KALIBRATIONSKURVE 59 11 VALIDIERUNG DES FLUOXETIN - ELISA 61 11.1
QUALITAETSPARAMETER EINES ENZYMIMMUNOASSAYS 61 11.2 BESTIMMUNG DER
PRAEZISION DES FLUOXETIN-ELISA 62 INHALTSVERZEICHNIS IV 11.3 BESTIMMUNG
DER NACHWEIS- UND BESTIMMUNGSGRENZE 63 11.4 BESTIMMUNG DER
KREUZREAKTIVITAET 65 11.5 BESTIMMUNG DER RICHTIGKEIT 68 12 FLUOXETIN -
ELISA MIT KLINISCHEN PROBEN 71 12.1 FLUOXETIN-BESTIMMUNG AUS BLUTSERUM
NACH ORALER EINNAHME 71 12.2 FLUOXETIN-BESTIMMUNG AUS URIN NACH ORALER
EINNAHME 73 13 VERGLEICH DES ELISA MIT DER HPLC - ANALYTIK 74 14
ZUSAMMENFASSUNG 76 PRAKTISCHER TEIL 15 ALLGEMEINES 79 15.1 GERAETE UND
MATERIALIEN 79 15.2 ALLGEMEINE APPARATIVE METHODEN , 80 15.3 HAEUFIG
VERWENDETE PUFFER UND LOESUNGEN 81 16 ORGANISCH - PRAEPARATIVER TEIL I 83
16.1 FLUOXETINSYNTHESE 83 16.1.1 STUFE I: 3-CHLOR-1-PHENYL-PROPAN-1-ON
83 16.1.2 STUFE II: 3-CHLOR-1-PHENYL-1-PROPANOL 84 16.1.3 STUFE III:
3-LOD-1-PHENYL-1-PROPANOL 85 16.1.4 STUFE IV :
N-METHYL-3-PHENYL-3-HYDROXYPROPYLAMIN 85 16.1.5 STUFE V :
N-METHYL-3-PHENYL-3-(P-TRIFLUORPYHENOXY)-PROPYLAMIN 86
INHALTSVERZEICHNIS 16.2 SYNTHESE DES VOLLANTIGENS 89 16.2.1 SPACEREINBAU
89 16.2.1.1 N-(2-CARBOXYETHYL)-FLUOXETIN(F.-SPAC.) 89 16.2.1.2
N-(3-CARBOXYPROPIONYL)-FLUOXETIN (F.-SUCC.) 91 16.2.2 ANBINDUNG AN BSA
93 16.3 AUFARBEITUNG DES VOLLANTIGENS 94 16.3.1 DIALYSE UND
LYOPHILISATION 94 17 SPEKTROSKOPISCHE ANALYTIK DES VOLLANTIGENS 95 17.1
ABSORPTIONSMAXIMA UND MOLARE EXTINKTIONSKOEFFIZIENTEN S 95 17.2
BERECHNUNG 95 18 IMMUNOLOGISCHER TEIL 96 18.1 IMMUNISIERUNG 97 18.2
ENTNAHME 97 18.3 SERUMGEWINNUNG 98 18.4 VORKOMMNISSE WAEHREND DER
IMMUNISIERUNGS- UND ENTNAHMEPHASE 98 19 IMMUNCHEMISCHER TEIL 99 19.1
AGARGEL-DOPPELDIFFUSION NACH OUCHTERLONY 99 19.1.1 HERSTELLUNG DER
AGAROSELOESUNG 99 19.1.2 HERSTELLUNG DER AGAROSEGELPLATTEN 99 19.1.2.1
SCHEMA 1 (ZUR PRINZIPIELLEN UEBERPRUEFUNG DER ANTIKOERPERBILDUNG) ..99
19.1.2.2 SCHEMA 2 (ZUM AUSTESTEN DER ABSORPTION MIT BSA) 100 19.1.3
AUSFUEHRUNG DER AGAROSEGELDIFFUSION 100 19.1.3.1 SCHEMA 1 100 19.1.3.2
SCHEMA 2 101 19.1.4 ANFAERBEN DER GELE UND SICHTBARMACHEN DER PRAEZIPITATE
101 19.1.4.1 FAERBELOESUNG 101 19.1.4.2 ENTFAERBELOESUNG 101
INHALTSVERZEICHNIS VI_ 19.1.4.3 BEHANDLUNG DER GELPLATTEN 101 19.2
ABSORPTION DERANTISERA MIT BSA 101 19.3 BESTIMMUNG DES EIWEISSGEHALTES
DERANTISERA NACH BRADFORD 101 19.3.1 HERSTELLUNG DER BSA-STAMMLOESUNG 101
19.3.2 HERSTELLUNG DER FARBSTOFFLOESUNG 102 19.3.3 HERSTELLUNG DER
BEZUGSGERADEN 102 19.3.4 ZUGABE DER FARBSTOFFLOESUNG 103 19.3.5 MESSUNG
103 19.3.6 AUSWERTUNG 103 19.3.7 BEZUGSGERADE 103 20 GEWINNUNG DER Y -
GLOBULINFRAKTION 105 20.1 VORBEHANDLUNG DER DEAE32 CELLULOSE
(PRE-CYCLING) 105 20.2 SCHLAMMVORBEREITUNG (SLURRY PREPARATION) 105 20.3
PACKEN DER SAEULE 106 20.4 PROBENVORBEREITUNG UND LADEN 107 21 ORGANISCH
- PRAEPARATIVER TEIL II 108 21.1 HERSTELLUNG VON ENZYMKONJUGATEN 108 21.2
ANALYTIK DER DIALYSIERTEN ENZYMKONJUGATE ; 109 22 AUFBAU UND OPTIMIERUNG
DES FLUOXETIN - ELISA 111 22.1 ERMITTLUNG OPTIMALER ANTIKOERPER- UND
ENZYMKONJUGATKONZENTRATIONEN 111 22.1.1 DURCHFUEHRUNG 111 22.1.2
ENZYMKONJUGAT - VERDUENNUNGSREIHE 112 22.1.3 ARBEITSSCHRITTE 112 22.2
SCREENING DER VERSCHIEDENEN ANTISEREN 113 22.2.1 ARBEITSSCHRITTE 113
22.3 ERMITTLUNG DER GUENSTIGSTEN COATINGZEIT UND-TEMPERATUR 113 22.3.1
ARBEITSSCHRITTE 113 INHALTSVERZEICHNIS VII 22.4 ERMITTLUNG DER BESTEN
ANTIGEN-ANTIKOERPER-REAKTIONSZEIT 114 22.4.1 ARBEITSSCHRITTE . 114 22.5
ERSTELLUNG DER KALIBRATIONSKURVE 115 22.5.2 ARBEITSSCHRITTE 116 22.5.3
MESSWERTE 117 23 VALIDIERUNG DES FLUOXETIN - ELISA 118 23.1 PRAEZISION 118
23.1.1 INTRAASSAY-PRAEZISION (INTRASERIELLE PRAEZISION) 118 23.1.2
INTERASSAY-PRAEZISION (INTERSERIELLE PRAEZISION) 119 23.2 ERMITTLUNG DER
BESTIMMUNGSGRENZE 120 23.3 KREUZREAKTIONEN. 122 23.3.1 ARBEITSSCHRITTE
122 23.3.2 KREUZREAKTIONEN MIT FLUOXETINBAUSTEINEN 123 23.3.2.1
KREUZREAKTION MIT N-METHYL-3-PHENYL-3-HYDROXYPROPYLAMIN 123 23.3.2.2
KREUZREAKTION MIT TRIFLUORMETHYLPHENOL 124 23.3.3 KREUZREAKTION MIT
GRUNDKOERPERANALOGA 125 23.3.3.1 KREUZREAKTION MIT EPHEDRIN-HCI 125
23.3.3.2 KREUZREAKTION MIT DIPHENHYDRAMIN-HCI 126 23.3.4 KREUZREAKTION
MIT FLUOXETIN-ANALOGA 127 23.3.4.1 KREUZREAKTION MIT UH-F 127 23.3.4.2
KREUZREAKTION MIT UH-F 3 128 23.3.5 PARAMETER AUS DEN VERDRAENGUNGSKURVEN
129 23.4 BESTIMMUNG DER RICHTIGKEIT 130 23.4.1 FLUOXETIN-HCI -
BESTIMMUNG AUS KUNSTURIN 130 23.4.1.1 HERSTELLUNG VON FLUOXETIN-HCI -
LOESUNGEN IN KUNSTURIN 130 23.4.1.2 ARBEITSSCHRITTE 131 23.4.1.3 MESSWERTE
UND AUSWERTUNG 131 23.4.2 FLUOXETIN-HCI - BESTIMMUNG AUS HUMANSERUM 132
23.4.2.1 SPIKENVON HUMANSERUM MIT FLUOXETIN-HCI 132 23.4.2.2
ARBEITSSCHRITTE 132 23.4.2.3 MESSWERTE UND AUSWERTUNG 132
INHALTSVERZEICHNIS VIII 24 FLUOXETIN - ELISA MIT KLINISCHEN PROBEN 133
24.1 FLUOXETIN-BESTIMMUNG AUS BLUTSERUM NACH ORALER EINNAHME 133 24.1.1
ARBEITSSCHRITTE 133 24.1.2 MESSWERTE 133 24.2 FLUOXETIN-BESTIMMUNG AUS
HUMANURIN NACH ORALER EINNAHME 134 24.2.1 VERSUCHE ZUR ENZYMATISCHEN
GLUCURONIDSPALTUNG 135 25 ORIENTIERENDE HPLC - UNTERSUCHUNG 136 25.1
CHROMATOGRAPHISCHE BEDINGUNGEN 136 25.2 CHROMATOGRAPHISCHE TRENNGROESSEN
136 25.3 AUFSTELLEN EINER KALIBRATIONSGERADEN 137 25.4 BASISCHE
EXTRAKTION VON FLUOXETIN AUS BLUTSERUM 139 26 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 140
27 LITERATURVERZEICHNIS 142
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| title_sort | entwicklung eines direkten heterogen kompetitiven enzymimmunoassays fur das antidepressivum r s fluoxetin |
| topic | Fluoxetin (DE-588)4255786-0 gnd Enzymimmunassay (DE-588)4152477-9 gnd |
| topic_facet | Fluoxetin Enzymimmunassay Hochschulschrift |
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