Promotormethylierung im Gen PITX1 bei juveniler myelomonozytärer Leukämie:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2018]
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adam_text | INHALT
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS...........................................................................................................
6
1
EINFUEHRUNG...............................................................................................................................9
1.1 JUVENILE MYELOMONOZYTAERE
LEUKAEMIE..............................................................................9
1.1.1
KLASSIFIKATION............................................................................................................9
1.1.2
KLINIK.........................................................................................................................9
1.1.3
DIAGNOSTIK...............................................................................................................
10
1.1.4 KLINISCHER
VERLAUF...................................................................................................
13
1.1.5
THERAPIE...................................................................................................................
13
1.2 PATHOPHYSIOLOGISCHE UND GENETISCHE ASPEKTE BEI
JMML.............................................15
1.3 PAIRED-LIKE HOMEODOMAIN TRANSCRIPTION FACTOR 1 {PITXI) ALS
TUMORSUPPRESSORGEN
.....
19
1.4
EPIGENETIK.......................................................................................................................
19
1.4.1 BEDEUTUNG DER EPIGENETIK IN DER TUMORGENESE
......................................................
19
1.4.2 BEDEUTUNG DER PROMOTORMETHYLIERUNG BEI DER
JMML............................................24
1.5
FRAGESTELLUNG..................................................................................................................27
2 MATERIAL UND
METHODEN........................................................................................................
28
2.1
MATERIAL..........................................................................................................................28
2.2 GERAETE UND
REAGENZIEN...................................................................................................30
2.2.1 PRINZIP DER
BISULFITSEQUENZIERUNG...........................................................................32
2.2.2
DNA-PURIFIKATION....................................................................................................34
2.2.3
BISULFIT-MODIFIKATION..............................................................................................35
2.2.4
AMPLIFIKATION..........................................................................................................36
2.2.5
KLONIERUNG...............................................................................................................38
2.2.6
SEQUENZIERUNG........................................................................................................
40
3
ERGEBNISSE............................................................................................................................
41
3.1 VORARBEITEN MIT DER ZELLLINIE
KASUMI-1.......................................................................41
3.1.1 ETABLIERUNG DER ERSTEN PCR UND DER NESTED PCR
..................................................
41
3.1.2 AUSWERTUNG DER DIREKTEN SEQUENZIERUNG
...............................................................
43
3.2 BISULFITSEQUENZIERUNG DER DNA VON GESUNDEN SPENDERN UND JMML-
PATIENTEN
..........
44
3.2.1 BISULFIT-MODIFIKATION UND AMPLIFIKATION
...............................................................
44
3.2.2 KLONIERUNG UND
SEQUENZIERUNG..............................................................................
44
3.3 AUSWERTUNG DER BISULFITSEQUENZIERUNG NACH KLONIERUNG
.............................................
46
3.3.1 GESUNDE
SPENDER....................................................................................................
46
3.3.2
JMML-PATIENTEN.....................................................................................................48
3.4 BEWERTUNG DER
ERGEBNISSE.......................................................................................51
4
DISKUSSION............................................................................................................................54
4.1 BEDEUTUNG DER MUTATIONSANALYSE BEI JMML
................................................................
54
4.2 METHYLIERUNG DES
PITXI
PROMOTORS..............................................................................
55
4.3 BEDEUTUNG DER EPIGENETIK FUER DIAGNOSTIK, PROGNOSE, KRANKHEITSVERLAUF
UND THERAPIE 61
5
ZUSAMMENFASSUNG................................................................................................................66
6
LITERATURVERZEICHNIS..............................................................................................................67
ANHANG...................................................................................................................................78
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG...............................................................................................
78
LEBENSLAUF...........................................................................................................................79
DANKSAGUNG
80
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