In-vitro-Untersuchung eines Zellmodells für die Entwicklung von Sonden in der molekularen Bildgebung und Therapie: Expression endothelialer Marker in einer Endothelzelllinie
Gespeichert in:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2004
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INHALTSVERZEICHNIS
4
INHALTSVERZEICHNIS
1
ZUSAMMENFASSUNG
.
7
2
EINLEITUNG
.
9
3
MATERIALIEN
.
21
3.1
S
UBSTANZEN
.
21
3.2
V
ERBRAUCHSMATERIALIEN
.
23
3.3
G
ERAETE
.
24
4
METHODEN
.
26
4.1
C
HARAKTERISIERUNG
DER
Z
ELLLINIE
SVEC4
10
.
26
4.2
Z
ELLKULTUR
.
26
4.2.1
AUFTAUEN
UND
KULTIVIEREN
VON
ZELLEN
.
26
4.2.2
PASSAGIEREN
VON
ZELLEN
.27
4.2.3
ZELLZAHLBESTIMMUNG
.
28
4.2.4
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
.28
4.3
V
ORUNTERSUCHUNGEN
ZUR
R
EZEPTORMARKIERUNG
.
29
4.3.1
MYKOPLASMENTEST
.
29
4.3.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
A
USSAATZELLZAHLEN
FUER
VERSCHIEDENE
WACHSTUMSZEITEN
.
30
4.3.3
OPTIMIERUNG
DER
ZELLADHAESION
FUER
DIE
UNTERSUCHUNGEN
AM
ELISA-READER
DURCH
VARIATION
VON
WASCHPUFFER
UND
WACHSTUMSMATRIX
.
31
4.4
U
NTERSUCHUNGEN
ZUR
E
XPRESSION
DER
O
BERFLAECHENREZEPTOREN
CD
106,
CD
105
UNDCD31
AUF
TNFA-STIMULIERTEN
SVE4-10-ZELLEN
.
35
4.4.1
UNTERSUCHUNGEN
AM
ELISA
-READER
ZUR
EXPRESSION
VON
CD1
06,
CD
105
UND
CD31
AUFSVE4-10-ZELLEN
NACH
SIMULATION
MIT
TNFA
.
36
4.4.2
UNTERSUCHUNGEN
DER
TNFA-STIMULIERTEN
CD106-EXPRESSION
.
AUF
SVE4-10-ZELLEN
IM
FLOW-CYTOMETER
(FACS-ANALYSE)
.
40
4.4.3
IMMUNHISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
VON
CD106
IN
SVE4-10-ZELLEN
NACH
STIMULATION
MIT
TNFA
.
42
4.5
E
LEKTRONENMIKROSKOPISCHER
N
ACHWEIS
SPEZIFISCH
AN
SVE4
1
0-Z
ELLEN
GEKOPPELTER
NANOPARTIKEL
.
43
INHALTSVERZEICHNIS
5
5
ERGEBNISSE
.
45
5.1
E
RGEBNISSE
DER
V
ORUNTERSUCHUNGEN
ZUR
R
EZEPTORMARKIERUNG
.
45
5.
1.1
MYKOPLASMENTEST
.
45
5.1.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
AUSSAATZELLZAHLEN
FUER
VERSCHIEDENE
WACHSTUMSZEITEN
.
46
5.1.3
VARIATION
VON
WASCHPUFFER
UND
WACHSTUMSMATRIX
ZUR
OPTIMIERUNG
DER
ZELLADHAESION
FUER
DIE
MESSUNGEN
AM
ELISA-READER
.
49
5.2
E
RGEBNISSE
DER
U
NTERSUCHUNGEN
AM
ELISA-R
EADER
ZUR
E
XPRESSION
VON
CD
106,
CD
105
UND
CD31
AUF
SVE4-1
0-Z
ELLEN
NACH
S
TIMULATION
MIT
TNFA
.52
5.3
E
RGEBNISSE
DER
FLOWCYTOMETRISCHEN
U
NTERSUCHUNG
DER
CD
1
06-E
XPRESSION
AUF
SVE4
1
O-Z
ELLEN
NACH
S
TIMULATION
MIT
TNFA
.
62
5.3.1
STIMULATION
MIT
5
NG/ML
TNFA
.
62
5.3.2
STIMULATION
MIT
50
NG/ML
TNFA
.
66
5.4
E
RGEBNISSE
DER
FLUOROMETRISCHEN
U
NTERSUCHUNGEN
DER
BEIDEN
UNABHAENGIGEN
METHODEN
.
70
5.5
Z
YTOTOXISCHE
W
IRKUNG
VON
TNFA
.
70
5.6
E
RGEBNISSE
DER
I
MMUNHISTOCHEMISCHEN
D
ARSTELLUNG
DER
E
XPRESSION
VON
CD1
06
AUF
SVE4-1
0-Z
ELLEN
NACH
S
TIMULATION
MIT
TNFA
.
71
5.7
E
RGEBNISSE
DER
SPEZIFISCHEN
B
INDUNG
EINER
M
ODELLSONDE
(
MAGNETISCHE
N
ANOPARTIKEL
)
AN
DEN
CD106-R
EZEPTOR
STIMULIERTER
SVE4-1
0-Z
ELLEN
.
73
6
DISKUSSION
.
77
6.1
D
ISKUSSION
DER
P
ARAMETEROPTIMIERUNG
ZUR
R
EZEPTORUNTERSUCHUNG
.
77
6.1.1
UNTERSUCHUNG
DER
ZELLKULTUR
AUF
STERIL
ITAET
.
77
6.1.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
AUSSAATZELLZAHLEN
FUER
VERSCHIEDENE
WACHSTUMSZEITEN
.
78
6.1.3
VARIATION
VON
WASCHPUFFER
UND
WACHSTUMSMATRIX
ZUR
OPTIMIERUNG
DER
ZELLADHAESION
IN
DEN
MESSUNGEN
AM
ELISA-READER
.
80
6.2
D
ISKUSSION
DER
AM
ELISA-R
EADER
UNTERSUCHTEN
E
XPRESSION
VON
CD1
06,
CD
105
UND
CD3
1
AUF
SVE4
1
0-Z
ELLEN
NACH
S
IMULATION
MIT
TNFA
.
83
6.3
D
ISKUSSION
DER
IM
F
LOW
-C
YTOMETER
UNTERSUCHTEN
TNFA-STIMULIERTEN
CD
1
06-E
XPRESSION
AUF
SVE4-1
0-Z
ELLEN
.
88
6.4
V
ERGLEICH
DER
F
LUORESZENZDETEKTIONSMETHODEN
.
92
6.5
Z
YTOTOXISCHE
W
IRKUNGEN
VON
TNFA
.
95
INHALTSVERZEICHNIS
6
6.6
A
NKOPPLUNG
EINER
M
ODELLSONDE
AN
STIMULIERTE
SVE4
1
O-Z
ELLEN
.
99
7
SCHLUSSFOLGERUNG
.
102
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
104
9
DANKSAGUNG
10
LEBENSLAUF
11
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG |
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