Nachweis und Isolierung eines Autoantikörpers gegen Proteindisulfid Isomerase bei einem infertilen Patienten:
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2003
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Beschreibung: | Bonn, Univ., Diss., 2003 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
6
2
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1
MATERIALIEN
2.1.1
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
10
2.1.2
LOESUNGEN
UND
MEDIEN
12
2.1.3
CDNA
BIBLIOTHEKEN
14
2.1.4
GERAETE,
FILTER
UND
HPLC
SAEULEN
14
2.2
AUSWAHL
DER
PATIENTEN
15
2.3
ENTNAHME
DER
PROBEN
16
2.4
GEWINNUNG
DES
SERUMS
16
2.5
HALTUNG
DER
TIERE
16
2.6
WESTERN-BLOT
MIT
AUTOANTIKOERPEM
DER
KLASSE
IG
G
17
2.6.1
ENTNAHME
DER
GEWEBE
BEI
MAEUSEN
17
2.6.2
BEREITSTELLEN
DER
SPERMIEN
17
2.6.3
AUFBEREITUNG
DER
PROBEN
FUER
DIE
GELELEKTROPHORESE
17
2.6.4
SDS
GELELEKTROPHORESE
18
2.6.5
TRANSFER
DER
PROTEINE
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRAN
19
2.6.6
IMMUNOLOGISCHE
DETEKTION
20
2.7
FAERBEN
VON
ACRYLAMIDGELEN
2.7.1
COOMASSIEFAERBUNG
20
2.7.2
SILBERFAERBUNG
NACH
BLUM
ET
AL.
(1987)
20
2.8
DURCHSICHT
VON
CDNA
BIBLIOTHEKEN
MIT
AUSGEWAEHLTEN
SEREN
2.8.1
DURCHSICHT
DER
UNI-ZAP
XR
LIBRARY
22
2.8.1.1
VORBEREITUNG
DER
WIRTSZELLEN
22
2.8.1.2
VORBEREITUNG
DER
IPHAGEN
22
2.8.1.3
SCREENING
DER
UNI-ZAP
XR
LIBRARY
23
2.8.1.4
ENTNAHME
FRAGLICH
POSITIVER
PLAQUES
23
2.8.2
DURCHSICHT
DER
PH.D.-7
PHAGE
DISPLAY
LIBRARY
24
2.8.2.1
VORBEREITUNG
DER
WIRTSZELLEN
24
2.S.2.2
VORBEREITUNG
DER
M
13
PHAGEN
24
2.8.2.3
BESCHICHTEN
DER
ELISA
PLATTEN
25
2.8.2.4
PANNING
DER
PH.D.-7
PHAGE
DISPLAY
LIBRARY
2.8.2.5
AMPLIFIKATION
DER
GEWONNENEN
PHAGEN
2.8.2.6
KONTROLLE
DER
GEWONNENEN
PHAGEN
MIT
ELISA
25
25
26
2.9
ISOLIERUNG
VON
PROTEINEN
MIT
HILFE
DER
HPLC
2.9.1
AUFBEREITUNG
DER
GEWEBEPROBE
FUER
DIE
HPLC
2.9.2
PROTEINQUANTIFIKATION
NACH
LOWRY
(1951)
2.9.3
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
2.9.3.1
HITRAP
HEPARIN
SAEULE
2.9.3.2
HITRAP
BLUE
2.9.4
HYDROXYLAPATID
SAEULE
2.9.5
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
2.9.5.1
AUSWAHL
DER
MATRIX
MIT
HITRAP
IEX
KIT
2.9.5.2
UNO
SAEULE
2.9.6
AUFREINIGUNG
DES
SERUMS
2.10
MALDI-MASSENFINGERPRINT
2.11
DATENBANK
MASSENVERGLEICH
3
ERGEBNISSE
3.1
AUSWAHL
DES
SERUMS
3.2
SCREENING
DER
UNI-ZAP
XR
LIBRARY
3.3
SCREENING
DER
PH.D.-7
PHAGE
DISPLAY
LIBRARY
3.4
ISOLIERUNG
DER
PROTEINE
MIT
HPLC
3.4.1
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
3.4.1.1
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
MIT
HITRAP
HEPARI
3.4.1.2
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
MIT
HITRAP
BLUE
3.4.2
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
3.4.2.1
UNO-6
SAEULE
3.5
SDS
PAGE
3.6
PROTEINANALYSE
3.6.1
EDMAN
DEGRADATION
3.6.2
MALDI-MASSENSPEKTROMETRIE
3.6.3
DATENBANKSUCHE
4
DISKUSSION
47
I
OE
OE
FC
FE
S
$
3
S
S
8
UE
OE
S
S
S
S
G
G
S
S
T
AE
Y
T
AE
S
4
ZUSAMMENFASSUNG
52
LITERATURVERZEICHNIS
54
LISTE
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
61
LEBENSLAUF
63
5 |
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