Vergleich der genetischen Eigenschaften von bone marrow derived mesenchymal stem cells und trabecular bone derived mesenchymal stem cells:
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| adam_text | AUS DEM MUSKULOSKELETTALEN ZENTRUM WORZBURG (MCW)
ORTHOPAEDISCHE KLINIK KOENIG LUDWIG HAUS
DER UNIVERSITAET WORZBURG
VORSTAND: PROFESSOR DR. MED. FRANZ JAKOB
VERGLEICH DER
GENETISCHEN EIGENSCHAFTEN VON
BONE MARROW DERIVED
MESENCHYMAL STERN CELLS
UND TRABECULAR
BONE DERIVED
MESENCHYMAL
STERN CELLS
INAUGURAL - DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DER DOKTORWUERDE DER
MEDIZINISCHEN FAKULTAET
DER
JULIUS-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET WUERZBURG
VORGELEGT VON
MAXIMILIAN HEITMANN
AUS BERLIN
WUERZBURG, APRIL 2014
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. BEDEUTUNG DER STAMMZELLEN IN DER MODERNEN MEDIZIN 1
1.2. STAMMZELLEN 2
1.2.1. EMBRYONALE STAMMZELLEN (ESCS) 2
1.2.2. HAEMATOPOIETISCHE STAMMZELLEN (HSCS) 3
1.2.3. MESENCHYMALE STAMMZELLEN (MSCS) 5
1.3. VORKOMMEN DER MSCS IM ADULTEN ORGANISMUS 9
1.4. EPITHELIALE MESENCHYMALE TRANSITION (EMT) 10
1.5. DIE NISCHE DER MSCS 11
1.6. DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL DER MSCS 12
1.7. THERAPEUTISCHE MOEGLICHKEITEN DER MSCS UND TISSUE ENGINEERING 14
1.8. ZIELSETZUNG DIESER DISSERTATION 19
2. MATERIAL
UND METHODEN 21
2.1. MATERIALEN 21
CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 21
ZELLKULTURMEDIEN UND BESTANDTEILE 22
ENZYME 22
PUFFER- UND ANDERE LOESUNGEN 22
BAUSAETZE 23
2.2. METHODEN .....24
2.2.1. ZELLEN UND ZELLKULTUR 24
2.2.2. RNA- ISOLATION MIT DEM KIT *NUCLEOSPIN RNA II 27
2.2.3. CDNA-SYNTHESE 28
2.2.4. ARRAY-ANALYSE 28
2.2.5. RT-PCR 29
2.2.6. AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE 33
2.2.7. IMMUNCYTOCHEMIE 33
3. ERGEBNISSE 36
3.1. ARRAY-ANALYSEN 36
3.2. BESTAETIGUNG DER ERGEBNISSE DURCH RT-PCR (PASSAGE 0) 39
3.3. UEBEREINSTIMMUNG VON ARRAY UND PCR (PASSAGE 0) 41
3.4. VERGLEICH DER ARRAYS AUS PASSAGE 0 UND PASSAGE 1 43
3.5. IMMUNCYTOCHEMIE MIT CD24 47
4. DISKUSSION 48
4.1. VERSUCHSAUSWERTUNGEN 48
4.1.1. EXPERIMENTELLE BESTAETIGUNG DES MICROARRAYS 48
4.1.2. KONTAMINATION DER ZELLKULTUR PASSAGE 0 49
4.1.3. AUSWERTUNG UND BEDEUTUNG DER ANALYSIERTEN GENE 51
4.1.3.1. OSTEOGENE MARKERGENE 51
4.1.3.2. MYOGENE MARKERGENE 56
4.1.3.3. SONSTIGE UNTERSUCHTE GENE 59
4.2. STELLENWERT DER BHMSCS IN DER ADULTEN STAMMZELLFORSCHUNG IM
HINBLICK
AUF EXPRESSIONSUNTERSCHIEDE 62
4.3. STAMMZELLCHARAKTER DER MSCS 63
4.4. ZUSAMMENFASSENDE SCHLUSSFOLGERUNGEN 65
5. ZUSAMMENFASSUNG 68
6. LITERATURVERZEICHNIS 70
7. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 77
8. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 82
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