Differentielle Regulation der Rezeptoren für Platelet-Derived Growth Factor (PDGF) in menschlichen Fibroblasten:
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| Sprache: | German |
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1992
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| Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1994 (Nicht für den Austausch) |
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4
INHALTSVERZEICHNIS
1.0 EINLEITUNG
1.1. ENTDECKUNG VON PDGF
1.2. STRUKTUR UND BIOCHEMIE VON PDGF
1.3. STRUKTUR UND BIOCHEMIE DES PDGF-REZEPTORS
1.3.1. BINDUNGSMODELL
1.4. BIOLOGISCHE AKTIVITAET UND MOEGLICHE BEDEUTUNG VON
PDGF BEI PATHOLOGISCHEN PROZESSEN
1.5. WECHSELWIRKUNGEN VON PDGF MIT ANDEREN WACHSTUM
FAKTOREN, ZYTOKINEN, HORMONEN UND MEDIATOREN VON
ENTZUENDUNG UND WUNDHEILUNG
1.6 PDGF-VERMITTELTE REGULATION VON WACHSTUM UND
DIFFERENZIERUNG
1.7 FRAGESTELLUNG
2.0 MATERALIEN UND METHODEN
2.1. RADIOREZEPTO^ASSAY
2.2. DURCHFUEHRUNG
2.2.1. RADIOIODINATIONSPROTOKOLL
2.3. THYMIDININKORPORATIONSASSAY
2.4. ZELLKULTUR
2.4.1. PRIMAERKULTUREN
2.4.2. KULTIVIERUNG VON FIBROBLASTEN ZUR DURCHFUEHRUNG
VON NORTHERN BLOTS
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5
2.4.3. KULTIVIERUNG VON FIBROBLASTEN ZUR DURCHFUEHRUNG
DER RADIOREZEPTOR- UND DNS-SYNTHESEASSAYS
2.5. MIKRO- UND MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN
2.5.1. AUFBEWAHRUNG UND KULTIVIERUNG VON E.COLI
2.5.2. PLASMIDPRAEPARATION AUS TRANSFORMIERTEN BAKTERIEN
2.5.3. ISOLATION VON CDNA-FRAGMENTEN AUS REKOMBINANTEN
PLASMIDEN
2.5.4. RADIOAKTIVE MARKIERUNG VON CDNA FRAGMENTEN
DURCH RANDOM-PRIMING
2.5.5. STANDARDMETHODEN ZUR AUFARBEITUNG VON RNA
2.5.6. GELELEKTROPHORESE VON RNA
2.5.7. IMMOBILISIERUNG VON RNA AUF NYLONMEMBRANEN
2.5.8. HYBRIDISIERUNG VON NORTHERN BLOT FILTERN
2.5.9. AUTORADIOGRAMME
2.6. MATERIALIEN
2.6.1. ALLGEMEINE CHEMIKALIEN
2.6.2. RADIOCHEMIKALIEN
2.6.3. SPEZIELLE MOLEKULARBIOLOGISCHE CHEMIKALIEN
2.6.4. PUFFER UND LOESUNGEN
2.6.5. ZELLMEDIUM
2.6.6. HERSTELLUNG VON "PLASMA-DERIVED SERUM" (PDS)
3
.0 ERGEBNISSE
3.1. BINDUNGSVERHALTEN DER PDGF-ISOFORMEN PDGF-AA
UND PDGF-BB AN HUMANE FIBROBLASTEN IN ABHAENGIGKEIT
DER ZELLDICHTE
6
3.1.1. BINDUNG VON
125J-PDGF-BB AN HUMANE FIBROBLASTEN
BEI NIEDRIGER UND HOHER ZELLDICHTE
3.1.2. BINDUNG VON
125 J-PDGF-AA AN HUMANE FIBROBLASTEN
BEI HOHER UND NIEDRIGER DICHTE
3.1.3. BINDUNG VON 1
25J-PDGF-BB AN HUMANE FIBROBLASTEN BEI
NIEDRIGER UND HOHER DICHTE IN GEGENWART VON IM
UEBERSCHUSS VORHANDENEM PDGF-AA
3.2. EINFLUSS DER ZELLDICHTE AUF DIE MRNA-EXPRESSION
DER A-UND SS-UNTEREINHEIT DES PDGF-REZEPTORS
3.2.1. NORTHERN-BLOT ANALYSE DER PDGFA- UND SS-REZEPTOR
MRNA BEI UNTERSCHIEDLICHEN ZELLDICHTEN VOR
UND NACH STIMULATION MIT PDGF-BB
3.2.2. NORTHERN-BLOT ANALYSE DER A-REZEPTOR MRNA VON
IN VIER VERSCHIEDENEN DICHTEN AUSGESAETEN
FIBROBLASTEN
3.3. EINFLUSS DER ZELLDICHTE AUF DIE STIMULIERBARKEIT DER
DNS-SYNTHESE DURCH DIE PDGF ISOFORMEN PDGF-AA UND
PDGF-BB
3.3.1. STIMULIERBARKEIT DER DNS-SYNTHESE IN HUMANEN
FIBROBLASTEN DURCH PDGF-AA BEI NIEDRIGER UND HOHER
ZELLDICHTE
3.3.2. STIMULIERBARKEIT DER DNS-SYNTHESE IN HUMANEN
FIBROBLASTEN DURCH PDGF-BB UND FCS IN NIEDRIGER UND
HOHER DICHTE
3.4. UNTERSUCHUNG DES MECHANISMUS DER PDGFA-
REZEPTOR MRNA REDUKTION DURCH PDGF-BB
3.4.1. BESTIMMUNG DER HALBWERTSZEIT DER PDGFA-
UND SS-REZEPTOR MRNA IN HUMANEN FIBROBLASTEN
3.4.2. EINFLUSS DER PROTEINSYNTHESE AUF DIE MRNA EXPRESSION
7
DES PDGF A- UND SS-REZEPTORS
4.0 DISKUSSION
4.1 EINFLUSS DER ZELLDICHTE AUF DIE EXPRESSION VON
PDGF REZEPTOR MRNA UND PDGF REZEPTOR PROTEIN.
4.2. EINFLUSS VON PDGF AUF DIE EXPRESSION DER PDGFA-
REZEPTOR MRNA.
4.3. BEDEUTUNG DER ZELLDICHTEABHAENGIGEN REGULATIONSVOR
GAENGE IM ZUSAMMENHANG MIT DER HYPOTHESE AUTOKRINER
STIMULATION IN DER PRAEREPLIKATIVEN PHASE HUMANER
FIBROBLASTEN.
4.4. BEDEUTUNG DER ZELLDICHTEABHAENGIGEN REGULATION
VON WACHSTUMSFAKTORREZEPTOREN IM ZUSAMMENHANG
MIT DER ENTSTEHUNG UND DEM WACHSTUM VON TUMOREN.
4.5. MOEGLICHE BEDEUTUNG DER DIFFERENTIELLEN REGULATION
DER BEIDEN REZEPTORUNTEREINHEITEN.
4.6. MECHANISMEN DER ZELLDICHTEABHAENGIGEN REGULATION DER
PDGF-REZEPTOREN, WEITERFUEHRENDE EXPERIMENTE.
4.7. VERGLEICH DER^HALBWERTSZEIT DER A-REZEPTOR
MRNA MIT DER DURCH PDGF-BB INDUZIERTEN ABNAHME DER
A-REZEPTOR MRNA EXPRESSION.
5.0 ZUSAMMENFASSUNG
ABBILDUNGEN UND LEGENDEN
LITERATURVERZEICHNIS
LEBENSLAUF
DANKSAGUNG |
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