Untersuchungen zur Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus sp. und Haematococcus pluvialis:
Die vorliegende Arbeit befasst sich mit der Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus und Haematococcus pluvialis. Diese ließ sich durch eine Reihe von Stressfaktoren (Nitrat-, Phosphatmangel, Starklicht, Salzstress) in der Mehrzahl der untersuchten Spezies der Gattung Scenedesmus induzie...
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Veröffentlicht: |
Halle-Wittenberg
2009
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Zusammenfassung: | Die vorliegende Arbeit befasst sich mit der Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus und Haematococcus pluvialis. Diese ließ sich durch eine Reihe von Stressfaktoren (Nitrat-, Phosphatmangel, Starklicht, Salzstress) in der Mehrzahl der untersuchten Spezies der Gattung Scenedesmus induzieren. Der Einsatz von 569 mM NaCl führte zu einer signifikanten Steigerung der Astaxanthin- und Sekundärcarotinoid-Gehalte von 4,47 mg/ g TS auf 12,96 mg/ g TS. Sowohl Scenedesmus als auch H. pluvialis synthetisierte eine komplexe Mischung an sekundären Carotinoiden und ihren Fettsäureestern, deren Struktur mittels LC-MS-Kopplung aufgeklärt werden konnte. Es wurde gezeigt, dass neben Astaxanthinestern auch andere Carotinoidester wie z.B. Lutein-, Adonixanthin und Adonirubinester in stressexponierten Stämmen akkumulieren. Die Astaxanthin-Enantiomere konnten mit einer chiralen HPLC-Phase (Cellulose-tris-3,5-Dimethylphenylcarbamat) getrennt werden. Es wurde eine Grünalge der Gattung Scenedesmus selektiert und charakterisiert, die 3S,3’S-Astaxanthin in Ausbeuten synthetisiert, die aufgrund der hohen Biomasseproduktivität mit denen von H. pluvialis vergleichbar sind, wobei der Veresterungsgrad in Scenedesmus deutlich geringer ist. Die Astaxanthin-Synthese erfolgt in den untersuchten Grünalgen simultan über zwei Wege: über β-Cryptoxanthin, Zeaxanthin und Adonixanthin sowie über Echinenon, Canthaxanthin und Adonirubin. Für die Scenedesmus-Spezies konnte gezeigt werden, dass Lutein in ähnlich hohen Gehalten wie β-Carotin in den stressexponierten Stämmen vorkommt und als Vorstufe für die Ax-Biosynthese in Frage kommt. Für die Untersuchung der Ax-BS auf molekularbiologischer Ebene wurde das Schlüsselenzym des Biosyntheseweges, die β-Carotin-Ketolase (BKT), ausgewählt. Es konnte erstmals ein Fragment eines BKT-Gens aus Scenedesmus kloniert und durch eine 5’RACEPCR verlängert werden. Die abgeleitete Aminosäure-Sequenz zeigte orthologe Bereiche zur Aminosäure-Sequenz aus H. pluvialis, M. zofingiensis und Chlamydomonas reinhardtii |
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spelling | Grewe, Claudia 1979- Verfasser (DE-588)139369937 aut Untersuchungen zur Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus sp. und Haematococcus pluvialis von Claudia Grewe. Gutachter: Prof. Dr. Gerd-Joachim Krauß ; Prof. Dr. Carola Griehl ; Prof. Dr. Michael Borowitzka Halle-Wittenberg 2009 Online-Ressource (140 Blätter) Illustrationen, Diagramme txt rdacontent c rdamedia cr rdacarrier Dissertation Naturwissenschaftlichen Fakultät I - Biowissenschaften der Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg 2009 Die vorliegende Arbeit befasst sich mit der Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus und Haematococcus pluvialis. Diese ließ sich durch eine Reihe von Stressfaktoren (Nitrat-, Phosphatmangel, Starklicht, Salzstress) in der Mehrzahl der untersuchten Spezies der Gattung Scenedesmus induzieren. Der Einsatz von 569 mM NaCl führte zu einer signifikanten Steigerung der Astaxanthin- und Sekundärcarotinoid-Gehalte von 4,47 mg/ g TS auf 12,96 mg/ g TS. Sowohl Scenedesmus als auch H. pluvialis synthetisierte eine komplexe Mischung an sekundären Carotinoiden und ihren Fettsäureestern, deren Struktur mittels LC-MS-Kopplung aufgeklärt werden konnte. Es wurde gezeigt, dass neben Astaxanthinestern auch andere Carotinoidester wie z.B. Lutein-, Adonixanthin und Adonirubinester in stressexponierten Stämmen akkumulieren. Die Astaxanthin-Enantiomere konnten mit einer chiralen HPLC-Phase (Cellulose-tris-3,5-Dimethylphenylcarbamat) getrennt werden. Es wurde eine Grünalge der Gattung Scenedesmus selektiert und charakterisiert, die 3S,3’S-Astaxanthin in Ausbeuten synthetisiert, die aufgrund der hohen Biomasseproduktivität mit denen von H. pluvialis vergleichbar sind, wobei der Veresterungsgrad in Scenedesmus deutlich geringer ist. Die Astaxanthin-Synthese erfolgt in den untersuchten Grünalgen simultan über zwei Wege: über β-Cryptoxanthin, Zeaxanthin und Adonixanthin sowie über Echinenon, Canthaxanthin und Adonirubin. Für die Scenedesmus-Spezies konnte gezeigt werden, dass Lutein in ähnlich hohen Gehalten wie β-Carotin in den stressexponierten Stämmen vorkommt und als Vorstufe für die Ax-Biosynthese in Frage kommt. Für die Untersuchung der Ax-BS auf molekularbiologischer Ebene wurde das Schlüsselenzym des Biosyntheseweges, die β-Carotin-Ketolase (BKT), ausgewählt. Es konnte erstmals ein Fragment eines BKT-Gens aus Scenedesmus kloniert und durch eine 5’RACEPCR verlängert werden. Die abgeleitete Aminosäure-Sequenz zeigte orthologe Bereiche zur Aminosäure-Sequenz aus H. pluvialis, M. zofingiensis und Chlamydomonas reinhardtii lzar Sprache der Zusammenfassung: Englisch Biosynthese (DE-588)4006902-3 gnd rswk-swf Grünalgen (DE-588)4072124-3 gnd rswk-swf Haematococcus pluvialis (DE-588)4546834-5 gnd rswk-swf Astaxanthin (DE-588)4362622-1 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Astaxanthin (DE-588)4362622-1 s Biosynthese (DE-588)4006902-3 s Haematococcus pluvialis (DE-588)4546834-5 s DE-604 Grünalgen (DE-588)4072124-3 s Krauß, Gerd-Joachim (DE-588)1059871688 dgs Griehl, Carola (DE-588)1144378486 dgs Borowitzka, Michael dgs Druckausg Grewe, Claudia: Untersuchungen zur Astaxanthin-Biosynthese in den Grünalgen Scenedesmus sp. und Haematococcus pluvialis https://opendata.uni-halle.de/handle/1981185920/6916 Volltext https://doi.org/10.25673/297 https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:3:4-313 http://d-nb.info/1024859827/34 Volltext http://digital.bibliothek.uni-halle.de/urn/urn:nbn:de:gbv:3:4-313 kostenfrei Volltext |
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