Untersuchung von verotoxin- und hämolysinbildenden Escherichia coli (E. coli) Stämmen isoliert aus gesunden Haus- und Nutztieren auf ihre phänotypischen und genotypischen Eigenschaften:
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
L
EINLEITUNG
UND
PROBLEMSTELLUNG
.
1
N.
LITERATURUEBERSICHT
.
3
2.
ESCHERICHIA
COLI
.
3
2.1
VEROTOXISCHE
ESCHERICHIA
COLI
(VTEC)
.
5
2.1.1
VEROTOXIN
1,
VEROTOXIN
2
UND
SEINE
VARIANTEN
.
6
2.1.2
AUFBAU
DES
VEROTOXIN
.
6
2.1.3
VEROTOXIN
UND
SEINE
BINDUNGSREZEPTOREN
.
7
2.1.4
WIRKUNGSWEISE
VON
VEROTOXIN
.
8
2.1.5
KODIERUNG
DER
GENE
FUER
DIE
PRODUKTION
VON
VEROTOXIN
.
8
2.1.6
NACHWEISMETHODEN
FUER
VTEC
.
8
2.2
ERKRANKUNGEN
DURCH
VTEC
.
10
2.2.1
ERKRANKUNGEN
DES
MENSCHEN
.
10
2.2.1.1
HAEMORRHAGISCHE
COLITIS
(HC)
.
10
2.2.1.2
HAEMOLYTISCH
URAEMISCHES
SYNDROM
(HUS)
.
11
2.2.1.3
THROMBOTISCH
THROMBOZYTOPENISCHE
PURPURA
(TTP)
.
11
2.2.2
ERKRANKUNGEN
BEI
SCHWEINEN.
12
2.2.3
ERKRANKUNGEN
BEI
RINDERN
.
12
2.2.4
NUTZTIERE
ALS
TRAEGER
VON
VTEC
UND
DAMIT
ALS
QUELLE
FUER
INFEKTIONEN
DES
MENSCHEN
.
13
2.3
HAEMOLYSINE
BEI
E.
COLI
.
14
2.4
ADHAESINE
UND
KOLONISATIONSFAKTOREN
BEI
VTEC
.
16
2.4.1
ADHAESION
.
16
2.4.2
AEUSSERE
MEMBRANPROTEINE
.
18
2.4.3
FIMBRIEN
.
19
SEITE
2.5
COLICIN
.
21
2.6
AEROBAKTIN
.
22
2.7
AUXOTROPHIE
.
23
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
25
3.
E.
CO/Z-TESTSTAEMME
.
25
3.1
FESTE
NAEHRBOEDEN
UND
FLUESSIGE
NAEHRMEDIEN
ZUR
KULTIVIERUNG
VON.
CO/Z-STAEMMEN
.
27
3.1.1
FESTE
NAEHRBOEDEN
.
27
3.1.2
FLUESSIGES
NAEHRMEDIUM
.
28
3.2
HERSTELLUNG
VON
GLYCEROL-BAKTERIENKULTUREN
ZUR
LANGZEITKONSER
VIERUNG
VON
BAKTERIEN
.
28
3.2.1
ZUSAMMENSETZUNG
DER
GLYCEROLLOESUNG
ZUR
KRYOKONSERVIERUNG.
29
3.2.2
VERFAHREN
.
29
3.3
HAEMAGGLUTINATIONSTEST
.
29
3.3.1
HERKUNFT
DER
HEFE
UND
DER
ERYTHROZYTEN
.
29
3.3.2
REAGENZIEN
FUER
DEN
HAEMAGGLUTINATIONSTEST
.
30
3.3.3
VERFAHREN
.
30
3.4
COLICINTEST
.
31
3.4.1
REAGENZIEN
UND
INDIKATORSTAMM
FUER
DEN
COLICINTEST
.
31
3.4.2
VERFAHREN
.
32
3.5
AEROBAKTINTEST
.
32
3.5.1
REAGENZIEN
UND
INDIKATORSTAMM
FUER
DEN
AEROBAKTINTEST
.
32
3.5.2
VERFAHREN
.
33
SEITE
3.6
AUXOTROPHIETEST
.
34
3.6.1
REAGENZIEN
UND
FESTE
NAEHRBOEDEN
FUER
DEN
AUXOTROPHIETEST
.
34
3.6.2
VERFAHREN
.
36
3.7
DNS-VERWANDSCHAFTSUNTERSUCHUNG
MIT
HILFE
DER
PULSFELD
GELELEKTROPHORESE
.
36
3.7.1
REAGENZIEN
UND
GELE
FUER
DIE
DNS-PRAEPARATION
.
36
3.7.2
VERFAHREN
.
38
3.8
PULSFELD-GELELEKTROPHORESE
DER
GESAMT-DNS
DER
CO/Z-STAEMME
.
39
3.8.1
REAGENZIEN
UND
GELE
FUER
DIE
PFGE
.
39
3.8.2
VERFAHREN
.
40
3.9
PRAEPARATION
VON
GESAMTMEMBRANEN
DER
E.
CO/Z-STAEMME
.
40
3.9.1
REAGENZIEN FUER
DIE
PRAEPARATION
DER
GESAMTMEMBRANEN.
40
3.9.2
VERFAHREN
.
41
3.10
PRAEPARATION
DER
AEUSSEREN
MEMBRANEN
DER
E.
CO/Z-STAEMME
DURCH
SARCOSYLEXTRAKTION
.
41
3.10.1
REAGENZIEN FUER
DIE
SARCOSYLEXTRAKTION.
42
3.10.2
VERFAHREN
.
42
3.11
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
DER
AEUSSEREN
MEMBRANPROTEINE
DER
CO/Z-STAEMME
.
43
3.11.1
REAGENZIEN
UND
GELE
FUER
DIE
PAGE
.
43
3.11.2
VERFAHREN
.
44
3.12
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
45
IV.
ERGEBNISSE
.
46
4.0
HAEMAGGLUTININE
UND
ADHAERENZFAKTOREN
.
46
4.0.1
HAEMAGGLUTINATIONSTEST
.
46
SEITE
4.0.2
SEROLOGISCHE
BESTIMMUNG
VON
FIMBRIEN.
48
4.1
COLICINTEST
.
48
4.2
AEROBAKTINTEST
.
50
4.3
AUXOTROPHIETEST
.
51
4.4
GENETISCHE
VERWANDTSCHAFTSUNTERSUCHUNG
MIT
HILFE
DER
PULSFELD-GELELEKTROPHORESE
(PFGE)
.
54
4.4.1
SEROTYP
021
:K5:H14
.
54
4.4.2
SEROTYP
0113
:H21
.
54
4.4.3
SEROTYP
O77:H4
.
54
4.4.4
SEROTYP
0X3
:H8
.
54
4.4.5
SEROTYP
O128:H2
.
56
4.4.6
SEROTYP
O108:H9
.
57
4.4.7
SEROTYP
O146:H21
.
57
4.4.8
SEROTYP
05
:H-.
57
4.4.9
SEROTYP
091:H
.
57
4.5
VERGLEICH
DER
AEUSSEREN
MEMBRANPROTEINE
DER
UNTERSUCHTEN
E.
COLI
STAEMME
MIT
HILFE
DER
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE.
58
V.
DISKUSSION
.
59
5.1
KONSTANZ DER
UNTERSUCHTEN
E.
CO/I-STAEMME
IN
DER
AUSPRAEGUNG
IHRER
PHAENO
UND
GENOTYPISCHEN
EIGENSCHAFTEN
.
59
5.2
KONSTANZ
DER
UNTERSUCHTEN
E.
CO/I-STAEMME
IN
DER
AUSPRAEGUNG
IHRER
PHAENO
UND
GENOTYPISCHEN
EIGENSCHAFTEN
BEZOGEN
AUF
DIE
UNTERSCHIEDLICHEN
TIERARTEN,
AUS
DENEN
SIE
ISOLIERT
WURDEN
.
60
SEITE
5.3
KONSTANZ DER
UNTERSUCHTEN
E.
CO/Z-STAEMME
IN
DER
AUSPRAEGUNG
IHRER
PHAENO
UND
GENOTYPISCHEN
EIGENSCHAFTEN,
BEZOGEN
AUF
DIE
UNTERSCHIEDLICHEN
HAUPTSEROTYPEN
.
61
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
63
VH.
SUMMERY
.
65
VIII.
LITERATURVERZEICHNIS
.
67
IX.
ANHANG
.
86
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF |
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