Die Beteiligung des intravaskulären TF-Systems an der Aktivierung der Blutgerinnung durch atherosklerotische Plaques:
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis 1_
Inhaltsverzeichnis 1
Abkürzungsverzeichnis 4
I. Einleitung 6
1.1. Bedeutung der Atherosklerose 6
1.2. Atherogenese 6
1.3. Plaqueruptur 9
1.4. Atherothrombose 11
1.4.1. Blutgerinnungssystem 11
1.4.2. Mechanismen der Plättchenadhäsion, -aktivierung und 14
-aggregation
1.4.3. Auslöse- und Verstärkermechanismen der Thrombusbildung 15
1.4.3.1. Einfluss der Plaquekomponenten auf die
Gerinnungsaktivierung 15
1.4.3.2. Die Bedeutung des intravaskulären TF 17
1.5. Zielsetzung 18
II. Material und Methoden 19
11.1. Material 19
11.1.1. Chemikalien, Lösungsmittel und Fertiglösungen 19
11.1.2. Antikörper, Inhibitoren, Proteasen, Gerinnungsfaktoren und
Substrate 19
11.1.3. Puffer 20
11.1.4. Materialien und Geräte 21
11.2. Methoden 23
11.2.1. Gewinnung des Lipidkerns atherosklerotischer Plaques 23
11.2.1.1. Bestimmung des TF-Gehaltes der Plaques 24
11.2.1.1.1. Proteinextraktion 24
11.2.1.1.2. Double-Sandwich-ELISA zur TF-Gehalt
Bestimmung 24
Inhaltsverzeichnis 2_
11.2.2 Blut- und Zellpräparation 25
11.2.2.1. Präparation von plättchenreichem bzw. plättchenarmen
Plasma 26
11.2.2.2. Blutzellisolierung 26
11.2.2.2.1. Thrombozytenisolierung 26
M.2.2.2.2. Bestimmung der Zellzahl und Zellviabilität 26
11.2.2.3. Mikropartikelgewinnung 27
11.2.3. Thrombelastographie 27
II.2.3.1. Versuchsprotokoll: Einsatz von Antikörpern im TEG 29
M.2.3.2. Versuchsprotokoll: Einsatz von MP im TEG 30
11.2.4. Faktor Xa Bildung 30
11.2.4.1. Versuchsprotokoll: Coatingversuche mit Anti-TF
Antikörper VIC7 31
11.2.5. Lipidextraktion 33
11.2.6. Proteinbestimmung mit der BCA-Methode 34
11.2.7. Statistik 34
IM. Ergebnisse 35
111.1. Der Lipidkern atherosklerotischer Plaques führt konzentrationsabhängig
zur Gerinnungsaktivierung 35
111.2. Die plaqueinduzierte Gerinnungsaktivierung ist abhängig von den
Thrombozyten 37
111.3. Die Gerinnungsaktivierung durch atherosklerotische Plaques ist abhängig
von TF 40
IM.4. TF-Gehalt der Lipidkeme atherosklerotischer Plaques 43
111.5. Atherosklerotische Plaques führen durch eine Thrombozytenaktivierung
zu einer Steigerung der TF Aktivität 44
111.6. MP steigern die TF Aktivität in Gegenwart plaquestimulierter
Thrombozyten 47
IM.7. Die prokoagulatorische Aktivität von TF ist abhängig von einer
PS-reichen Zelloberfläche 49
III.8. Atherosklerotische Plaques führen zur Aktivierung des intravaskulären
TF 50
Inhaltsverzeichnis 3
III.9. Lipidphase und wässrige Phase atherosklerotischer Kernregionen
tragen zur Gerinnungsaktivierung bei 51
IV. Diskussion 53
IV. 1. Gerinnungsaktivierung im Rahmen derAtherothrombose 53
IV.2. Plaque-TF 54
IV.3. Pathologische Bedeutung von intravaskulärem TF 55
IV 4. Die Bedeutung des thrombozytären TF für die pathologische
Gerinnungsaktivierung 56
IV.5. Die Bedeutung des MP-TF für die pathologische
Gerinnungsaktivierung 60
IV.6. Ausblick 62
V. Zusammenfassung 63
VI. Literaturverzeichnis M
VII. Anhang 83
VII. 1. Danksagung 83
VII.2. Lebenslauf 84
|
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Inhaltsverzeichnis 1_
Inhaltsverzeichnis 1
Abkürzungsverzeichnis 4
I. Einleitung 6
1.1. Bedeutung der Atherosklerose 6
1.2. Atherogenese 6
1.3. Plaqueruptur 9
1.4. Atherothrombose 11
1.4.1. Blutgerinnungssystem 11
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1.4.3.1. Einfluss der Plaquekomponenten auf die
Gerinnungsaktivierung 15
1.4.3.2. Die Bedeutung des intravaskulären TF 17
1.5. Zielsetzung 18
II. Material und Methoden 19
11.1. Material 19
11.1.1. Chemikalien, Lösungsmittel und Fertiglösungen 19
11.1.2. Antikörper, Inhibitoren, Proteasen, Gerinnungsfaktoren und
Substrate 19
11.1.3. Puffer 20
11.1.4. Materialien und Geräte 21
11.2. Methoden 23
11.2.1. Gewinnung des Lipidkerns atherosklerotischer Plaques 23
11.2.1.1. Bestimmung des TF-Gehaltes der Plaques 24
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11.2.2 Blut- und Zellpräparation 25
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Plasma 26
11.2.2.2. Blutzellisolierung 26
11.2.2.2.1. Thrombozytenisolierung 26
M.2.2.2.2. Bestimmung der Zellzahl und Zellviabilität 26
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11.2.3. Thrombelastographie 27
II.2.3.1. Versuchsprotokoll: Einsatz von Antikörpern im TEG 29
M.2.3.2. Versuchsprotokoll: Einsatz von MP im TEG 30
11.2.4. Faktor Xa Bildung 30
11.2.4.1. Versuchsprotokoll: Coatingversuche mit Anti-TF
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11.2.6. Proteinbestimmung mit der BCA-Methode 34
11.2.7. Statistik 34
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111.1. Der Lipidkern atherosklerotischer Plaques führt konzentrationsabhängig
zur Gerinnungsaktivierung 35
111.2. Die plaqueinduzierte Gerinnungsaktivierung ist abhängig von den
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111.3. Die Gerinnungsaktivierung durch atherosklerotische Plaques ist abhängig
von TF 40
IM.4. TF-Gehalt der Lipidkeme atherosklerotischer Plaques 43
111.5. Atherosklerotische Plaques führen durch eine Thrombozytenaktivierung
zu einer Steigerung der TF Aktivität 44
111.6. MP steigern die TF Aktivität in Gegenwart plaquestimulierter
Thrombozyten 47
IM.7. Die prokoagulatorische Aktivität von TF ist abhängig von einer
PS-reichen Zelloberfläche 49
III.8. Atherosklerotische Plaques führen zur Aktivierung des intravaskulären
TF 50
Inhaltsverzeichnis 3
III.9. Lipidphase und wässrige Phase atherosklerotischer Kernregionen
tragen zur Gerinnungsaktivierung bei 51
IV. Diskussion 53
IV. 1. Gerinnungsaktivierung im Rahmen derAtherothrombose 53
IV.2. Plaque-TF 54
IV.3. Pathologische Bedeutung von intravaskulärem TF 55
IV 4. Die Bedeutung des thrombozytären TF für die pathologische
Gerinnungsaktivierung 56
IV.5. Die Bedeutung des MP-TF für die pathologische
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