Untersuchungen zur Interaktion von Endothelialen Progenitorzellen mit der Endothelbarriere:
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2008
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 Einführung 1
1.1 Herzkreislauferkrankungen und Endothelfunktion 1
1.2 Endotheliale Dysfunktion 3
1.3 Angiogenese und Vaskulogenese 5
1.4 Stammzellen 7
1.4.1 Endotheliale Progenitorzellen 9
1.5 Ziel der Arbeit 16
2 Methoden 19
2.1 Zellisolierung und -Verarbeitung 19
2.1.1 Isolation Mononukleärer Zellen 19
2.1.2 Kultivierung Endothelialer Progenitorzellen 21
2.1.3 Markierung der Zellen 22
2.2 MNC - Perfusionen 24
2.2.1 Perfusion von MNC durch die isolierte Rattenaorta 24
2.2.1.1 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta 24
2.2.1.2 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta nach vorheriger
mechanischer Entfernung des Endothels 27
2.2.1.3 MNC - Perfusion und Kultivierung der Rattenaorta 27
2.2.2 Perfusion von MNC durch die Nabelschnur 27
2.2.3 Perfusion von MNC durch das isolierte Mäuseherz. 28
2.2.4 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit MNC 31
2.3 EPC - Perfusionen 33
2.3.1 Perfusion von EPC durch das isolierte Mäuseherz 33
2.3.2 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit EPC 34
2.4 Gewebefixierung und Färbung der Gewebestrukturen 34
2.5 Mikroskopische Auswertung 36
2.6 Statistische Auswertung 37
3 Ergebnisse 38
3.1 Bestimmung der Zellgrö en von MNC und kultivierten EPC 38
3.2 MNC - Perfusionen 41
3.2.1 Perfusion von MNC durch die isolierte Rattenaorta 41
3.2.1.1 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta nach vorheriger
mechanischer Entfernung des Endothels 46
3.2.1.2 MNC - Perfusion und Kultivierung der Rattenaorta 49
3.2.2 Perfusion von MNC durch die Nabelschnur 52
3.2.3 Perfusion von MNC durch das isolierte Mäuseherz. 55
3.2.4 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit MNC. 63
3.3 EPC - Perfusionen 70
3.3.1 Perfusion von EPC durch das isolierte Mäuseherz 70
3.3.2 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit EPC 73
3.3.3 Vergleich zwischen MNC und EPC am ischämischen
Herzen 78
3.4 Zusammenfassung der Ergebnisse 79
4 Diskussion 80
5 Zusammenfassung 94
6 Literaturverzeichnis 96
7 Vorabveröffentlichungen 113
8 Lebenslauf 114
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Inhaltsverzeichnis
1 Einführung 1
1.1 Herzkreislauferkrankungen und Endothelfunktion 1
1.2 Endotheliale Dysfunktion 3
1.3 Angiogenese und Vaskulogenese 5
1.4 Stammzellen 7
1.4.1 Endotheliale Progenitorzellen 9
1.5 Ziel der Arbeit 16
2 Methoden 19
2.1 Zellisolierung und -Verarbeitung 19
2.1.1 Isolation Mononukleärer Zellen 19
2.1.2 Kultivierung Endothelialer Progenitorzellen 21
2.1.3 Markierung der Zellen 22
2.2 MNC - Perfusionen 24
2.2.1 Perfusion von MNC durch die isolierte Rattenaorta 24
2.2.1.1 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta 24
2.2.1.2 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta nach vorheriger
mechanischer Entfernung des Endothels 27
2.2.1.3 MNC - Perfusion und Kultivierung der Rattenaorta 27
2.2.2 Perfusion von MNC durch die Nabelschnur 27
2.2.3 Perfusion von MNC durch das isolierte Mäuseherz. 28
2.2.4 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit MNC 31
2.3 EPC - Perfusionen 33
2.3.1 Perfusion von EPC durch das isolierte Mäuseherz 33
2.3.2 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit EPC 34
2.4 Gewebefixierung und Färbung der Gewebestrukturen 34
2.5 Mikroskopische Auswertung 36
2.6 Statistische Auswertung 37
3 Ergebnisse 38
3.1 Bestimmung der Zellgrö en von MNC und kultivierten EPC 38
3.2 MNC - Perfusionen 41
3.2.1 Perfusion von MNC durch die isolierte Rattenaorta 41
3.2.1.1 MNC - Perfusion durch die Rattenaorta nach vorheriger
mechanischer Entfernung des Endothels 46
3.2.1.2 MNC - Perfusion und Kultivierung der Rattenaorta 49
3.2.2 Perfusion von MNC durch die Nabelschnur 52
3.2.3 Perfusion von MNC durch das isolierte Mäuseherz. 55
3.2.4 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit MNC. 63
3.3 EPC - Perfusionen 70
3.3.1 Perfusion von EPC durch das isolierte Mäuseherz 70
3.3.2 Perfusionsversuche am ischämischen Gewebe mit EPC 73
3.3.3 Vergleich zwischen MNC und EPC am ischämischen
Herzen 78
3.4 Zusammenfassung der Ergebnisse 79
4 Diskussion 80
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7 Vorabveröffentlichungen 113
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