Charakterisierung des Taurocholattransportes an isolierten proximalen Tubuluszellen der Rattenniere:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einführung 1
1.1. Zielsetzung 1
2. Theoretische Grundlagen 3
2.1. Makroskopische Anatomie der Niere 3
2.2. Mikroskopische Anatomie der Niere 4
2.3. GefäDversorgung der Niere 7
2.4. Physiologie der Niere 9
2.4.1. Allgemeine Funktion der Niere 9
2.4.2. Ausscheidungsprozesse der Niere 9
2.4.2.1. Glomeruläre Filtration 9
2.4.2.2. Tubuläre Transportprozesse 10
2.4.3. Tubulärar Transport von Anionen 12
2.4.3.1. Charakteristika von Gallensäuren 12
2.4.3.2. Transport von Gallensäuren an der luminalen Membran 13
2.4.3.3. Molekulare Charakterisierung der Transporter 14
2.4.3.4. Transport von Gallensäuren an der basolateralen Membran 16
3. Material und Methoden 18
3.1. Isolierung proximaler Tubuluszellen 18
3.1.1. Zusammensetzung der Lösungen 18
3.1.2. Versuchsaufbau 20
3.1.3. Vorbereitungen 21
3.1.4. Versuchsdurchführung 21
3.1.4.1. Präparation der Ratte 21
3.1.4.2. Situs der Ratte 24
3.1.4.3. Perfusion der Nieren 24
3.1.4.4. Zentrifugation der Zellsuspension 25
3.1.4.5. Zählen der Zellen in der Neubauerkammer 26
3.1.4.6. Inkubation der Zellen in Inkubationspuffer und 3H Taurocholat 27
3.1.4.7. Messung der Radioaktivität im Flüssigkeitsszintillationszähler 27
3.1.4.8. Berechnung des Akkumulationsfaktors 28
3.2. Statistische Auswertung 29
3.2.1. Deskriptive Statistik 29
3.2.2. Konfirmative Statistik 31
3.2.2.1. Verbundener t Test 32
3.2.2.2. Unverbundenert Test 32
II
4. Ergebnisse 33
4.1. Hemmung der H PAH Akkumulation durch unmarkiertes PAH 33
4.1.1. Ziel 33
4.1.2. Versuchsdurchfübrung 33
4.1.3. Ergebnisse 33
4.2. Akkumulationsfaktoren bei Inkubation mit 3H Taurocholat 36
4.2.1. Ziel 36
4.2.2. Versuchsdurchführung 36
4.2.3. Ergebnisse 36
4.3. Zeitabhängigkeit der 3H Taurocholataufnahme 38
4.3.1. Ziel 38
4.3.2. Versuchsdurchführung 38
4.3.3. Ergebnisse 38
4.4. Hemmung der 3H Taurocholataufnahme bei Zugabe von unmarkiertem
Taurocholat 40
4.4.1 .Ziel 40
4.4.2. Versuchsdurchführung 40
4.4.3. Ergebnisse 40
4.5. Einfluß von Lithium auf die Taurocholatakkumulation 42
4.5.1. Ziel 42
4.5.2. Versuchsdurchfübrung 42
4.5.3. Ergebnisse 42
4.6. Einfluß von Probeneeid auf die Taurocholatakkumulation 44
4.6.1. Ziel 44
4.6.2. Versuchsdurchführung 44
4.6.3. Ergebnisse 44
4.7. Kinetik der ^ Taurocholatakkumulation 46
4.7.1. Taurocholatakkumulation in Abhängigkeit von der Konzentration 46
4.7.1.1. Ziel 46
4.7.1.2. Versuchsdurchführung 46
4.7.1.3. Ergebnisse 47
4.7.2. Taurocholataufnahme in Abhängigkeit von der Konzentration 49
4.7.2.1. Ziel 49
4.7.2.3. Ergebnisse 49
4.73. Berechnung der Daten zur Erstellung einer Geraden nach Eadie Hofstee
zur konzentrationsabhängigen Aufnahme von Taurocholat 52
4.7.3.1.Ziel 52
4.7.3.3. Ergebnisse 52
4.8. Untersuchung der Taurocholatakkumulation unter Na+ freien Bedingungen 54
4.8.1. Ziel 54
4.8.2. Versuchsdurchfünrung 54
4.8.3. Ergebnisse 54
III
5. Diskussion 57
5.1. Isolierung proiimaler Tubuluszellen 58
5.2. Nutzbarkeit der Tubuluszellen für die Untersuchung von Transportprozessen 59
5.3.3H Taurocholataufhahme 59
5.4. Ausblick 64
6. Zusammenfassung 65
7. Literaturverzeichnis 66
8. Anhang 74
IV
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis
1. Einführung 1
1.1. Zielsetzung 1
2. Theoretische Grundlagen 3
2.1. Makroskopische Anatomie der Niere 3
2.2. Mikroskopische Anatomie der Niere 4
2.3. GefäDversorgung der Niere 7
2.4. Physiologie der Niere 9
2.4.1. Allgemeine Funktion der Niere 9
2.4.2. Ausscheidungsprozesse der Niere 9
2.4.2.1. Glomeruläre Filtration 9
2.4.2.2. Tubuläre Transportprozesse 10
2.4.3. Tubulärar Transport von Anionen 12
2.4.3.1. Charakteristika von Gallensäuren 12
2.4.3.2. Transport von Gallensäuren an der luminalen Membran 13
2.4.3.3. Molekulare Charakterisierung der Transporter 14
2.4.3.4. Transport von Gallensäuren an der basolateralen Membran 16
3. Material und Methoden 18
3.1. Isolierung proximaler Tubuluszellen 18
3.1.1. Zusammensetzung der Lösungen 18
3.1.2. Versuchsaufbau 20
3.1.3. Vorbereitungen 21
3.1.4. Versuchsdurchführung 21
3.1.4.1. Präparation der Ratte 21
3.1.4.2. Situs der Ratte 24
3.1.4.3. Perfusion der Nieren 24
3.1.4.4. Zentrifugation der Zellsuspension 25
3.1.4.5. Zählen der Zellen in der Neubauerkammer 26
3.1.4.6. Inkubation der Zellen in Inkubationspuffer und 3H Taurocholat 27
3.1.4.7. Messung der Radioaktivität im Flüssigkeitsszintillationszähler 27
3.1.4.8. Berechnung des Akkumulationsfaktors 28
3.2. Statistische Auswertung 29
3.2.1. Deskriptive Statistik 29
3.2.2. Konfirmative Statistik 31
3.2.2.1. Verbundener t Test 32
3.2.2.2. Unverbundenert Test 32
II
4. Ergebnisse 33
4.1. Hemmung der 'H PAH Akkumulation durch unmarkiertes PAH 33
4.1.1. Ziel 33
4.1.2. Versuchsdurchfübrung 33
4.1.3. Ergebnisse 33
4.2. Akkumulationsfaktoren bei Inkubation mit 3H Taurocholat 36
4.2.1. Ziel 36
4.2.2. Versuchsdurchführung 36
4.2.3. Ergebnisse 36
4.3. Zeitabhängigkeit der 3H Taurocholataufnahme 38
4.3.1. Ziel 38
4.3.2. Versuchsdurchführung 38
4.3.3. Ergebnisse 38
4.4. Hemmung der 3H Taurocholataufnahme bei Zugabe von unmarkiertem
Taurocholat 40
4.4.1 .Ziel 40
4.4.2. Versuchsdurchführung 40
4.4.3. Ergebnisse 40
4.5. Einfluß von Lithium auf die Taurocholatakkumulation 42
4.5.1. Ziel 42
4.5.2. Versuchsdurchfübrung 42
4.5.3. Ergebnisse 42
4.6. Einfluß von Probeneeid auf die Taurocholatakkumulation 44
4.6.1. Ziel 44
4.6.2. Versuchsdurchführung 44
4.6.3. Ergebnisse 44
4.7. Kinetik der ^ Taurocholatakkumulation 46
4.7.1. Taurocholatakkumulation in Abhängigkeit von der Konzentration 46
4.7.1.1. Ziel 46
4.7.1.2. Versuchsdurchführung 46
4.7.1.3. Ergebnisse 47
4.7.2. Taurocholataufnahme in Abhängigkeit von der Konzentration 49
4.7.2.1. Ziel 49
4.7.2.3. Ergebnisse 49
4.73. Berechnung der Daten zur Erstellung einer Geraden nach Eadie Hofstee
zur konzentrationsabhängigen Aufnahme von Taurocholat 52
4.7.3.1.Ziel 52
4.7.3.3. Ergebnisse 52
4.8. Untersuchung der Taurocholatakkumulation unter Na+ freien Bedingungen 54
4.8.1. Ziel 54
4.8.2. Versuchsdurchfünrung 54
4.8.3. Ergebnisse 54
III
5. Diskussion 57
5.1. Isolierung proiimaler Tubuluszellen 58
5.2. Nutzbarkeit der Tubuluszellen für die Untersuchung von Transportprozessen 59
5.3.3H Taurocholataufhahme 59
5.4. Ausblick 64
6. Zusammenfassung 65
7. Literaturverzeichnis 66
8. Anhang 74
IV |
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