Untersuchungen zur Biosynthese der Moenomycine:
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1997
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I
NHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1.1
SEKUNDAERE
NATURSTOFFE
UND
BIOSYNTHESEUNTERSUCHUNGEN
.
1
1.2
METHODEN
ZUR
AUFKLAERUNG
VON
BIOSYNTHESEN
.
3
1.3
DIE
MOENOMYCIN-ANTIBIOTIKA
.
5
1.3.1
VORKOMMEN
UND
STRUKTUR
.
5
1.3.2
BIOSYNTHESE
DES
PEPTIDOGLYCANS
UND
WIRKMECHANISMUS
DER
MOENOMYCINE
.
6
2.
AUFGABENSTELLUNG
.
10
3.
UEBERLEGUNGEN
ZUR
BIOSYNTHESE
DER
MOENOMYCINE
.
11
3.1
BIOSYNTHESE
DER
EINHEIT
A
.
12
3.2
BIOSYNTHESE
DER
EINHEIT
F
.
13
3.3
BIOSYNTHESE
DER
EINHEIT
1
.
14
3.3.1
HYPOTHESE
FUER
DIE
BIOSYNTHESE
DES
NICHTISOPRENOIDEN
C
10
-MITTELSTUECKES
.
15
3.3.2
BIOSYNTHESE
VON
METABOLITEN
MIT
TERPENSTRUKTUR.
.
16
3.3.3
WEGE
ZUR
AUFKLAERUNG
DER
BIOSYNTHESE
VON
MOENOCINOL
.
17
3.3.4
ERSTE
FUETTERUNGSEXPERIMENTE
.
19
4.
GRUNDLAGEN
FUER
VERSUCHE
ZUR
BIOSYNTHESE
MIT
STABILEN
ISOTOPEN
.
20
4.1
METHODEN
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
DER
MOENOMYCINE
.
20
4.1.1
ZUSAMMENFASSUNG
BEKANNTER
DATEN
.
20
4.1.2
NMR-SPEKTROSKOPIE
.
21
4.1.2
HPLC
.
22
4.1.3
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
24
4.2
FERMENTATION
ZUR
GEWINNUNG
VON
MOENOMYCIN
.
29
4.2.1
ALLGEMEINE
BEDINGUNGEN
.
29
4.2.2
SCHUETTELKULTUREN
MIT
STREPTOMYCES
GHANAENSIS
H2
.
30
4.2.3
SCHUETTELKULTUREN
MIT
STREPTOMYCES
GHANAENSIS
ATCC
14672
.
31
4.2.4
FENNENTATION
MIT
WILDTYP
IM
3
1-MASSSTAB
.
32
5.
ISOLIERUNG
DER
MOENOMYCINE
.
34
6.
FUETTERUNGSVERSUCHE
MIT
13
C-MARKIERTEM
ACETAT
.
37
6.1
VORVERSUCHE
.
37
6.2
VERFAHREN
ZUR
AUSWERTUNG
DER
NMR-SPEKTREN
.
39
6.3
ERGEBNISSE
.
41
6.4
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.
43
6.5
AUSBLICK
.
45
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
47
X.
8.
EXPERIMENTELLER
TEIL
.
50
8.1
METHODEN
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
DER
MOENOMYCINE
.
50
8.1.1
HPLC
.
50
8.1.1.1
ALLGEMEINE
TRENNBEDINGUNGEN
.
50
8.1.1.2
QUANTITATIVE
BESTIMMUNGEN
MIT
HPLC
.
51
8.1.1.3
REINIGUNG
DES
MOENOMYCIN-STANDARDS
RH
1-31
.
52
8.1.1.4
VORBEREITUNG
DER
FERMENTATIONSPROBEN
.
52
8.1.1.5
FESTPHASENEXTRAKTION
ZUR
AUFKONZENTRIERUNG
DER
MOENOMYCINE
.
53
8.1.2
MIKROBIOLOGISCHER
DIFFUSIONSTEST
AUF
ANTIBIOTISCHE
AKTIVITAET
.
53
8.2
KULTIVIERUNG
VON
STREPTOMYCES
GHANAENSIS
-
ALLGEMEINE
PARAMETER
.
54
8.2.1
HERKUNFT
DER
FILR
NAEHRMEDIEN
VERWENDETEN
CHEMIKALIEN
.
54
8.2.2
NAEHRMEDIEN
.
54
8.2.3
STAMMHALTUNG
.
56
8.2.4
VORKULTUREN
ZUR
ANZUCHT
DER
BAKTERIEN
.
56
8.2.5
HAUPTKULTUREN
ZUR
PRODUKTION
VON
MOENOMYCIN
.
57
8.2.5.1
KULTURFIIHRUNG
IN
SCHUETTELKOLBEN
.
57
8.2.5.2
KULTURFIIHRUNG
IM
LABORFENNENTER
.
57
8.2.6
ROUTINEUNTERSUCHUNGEN
ZUR
KONTROLLE
DER
QUALITAET
DER
KULTUREN
.
58
8.3
OPTIMIERUNG
DER
PRODUKTION
VON
MOENOMYCIN
IN
SCHUETTELKULTUREN
.
60
8.3.1
UNTERSUCHUNG
DES
EINFLUSSES
DER
KOLBENFUELLUNG
.
60
8.3.2
UNTERSUCHUNG
DES
EINFLUSSES
EINER
TEMPERATUREMIEDRIGUNG
AM
ENDE
DER
LOGARITHMISCHEN
PHASE
.
61
8.4
ISOLIERUNG
DES
MOENOMYCIN-KOMPLEXES
.
62
8.4.1
ZENTRIFUGATION,
ZELLAUFSCHLUSS,
EXTRAKTION
.
62
8.4.2
ULTRAFILTRATION
.
63
8.4.3
PRAEPARATIVE
REVERSED
PHASE
-
CHROMATOGRAPHIE
.
64
8.5
VORVERSUCHE
FUER
DIE
FUETTERUNGSEXPERIMENTE
MIT
NATRIUMACETAT
.
64
8.5.1
BESTIMMUNG
DER
ACETATKONZENTRATIONEN
.
64
8.5.2
DURCHFUEHRUNG
DER
VORVERSUCHE
.
64
8.6
FUETTERUNGSEXPERIMENTE
MIT
MARKIERTEM
NATRIUMACETAT
.
67
8.7
SPEKTROSKOPISCHE
DATEN
.
69
9.
LITERATURVERZEICHNIS
UND
ANMERKUNGEN
.
71 |
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