Das melanomassoziierte Glykoprotein GP75: Sequenzierung des DNA-Fragmentes 75-1
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1992
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2
INHALTSVERZEICHNIS:
1. EINLEITUNG 4
1.1 TUMORPROGRESSION UND KLONALE EVOLUTION 6
1.2 DAS MELANOM IN DER GRUNDLAGENFORSCHUNG 8
1.3 ENTARTUNG IN DISKRETEN SCHRITTEN 8
1.4 STAGING DER VERSCHIEDENEN MELANOME 10
1.5 ERKENNUNG DER TRANSFORMATION AN DER EXPRESSION VON
OBERFLAECHENPROTEINEN 10
1.6 DAS GLYKOPROTEIN GP 75 12
2. MATERIAL UND METHODEN 14
2.1 VERWENDETE ABKUERZUNGEN: 14
2.2 HERKUNFTSNACHWEIS CHEMIKALIEN UND ENZYME 1 5
2.3 PUFFERLOESUNGEN UND NAEHRMEDIEN 1 8
2.3.1 PUFFERLOESUNGEN 18
2.3.2 NAEHRMEDIEN 20
2.4 VERDAUUNG MIT RESTRIKTIONSENZYMEN 22
2.5 AGAROSE GEL ELEKTROPHORESE 23
2.6 PREPARATION DER LAMBDA-DNA 25
2.7 SEQUENZREAKTIONEN LAMDA-PHAGE 27
2.8 SUBKLONIERUNG DES INSERTS IN PUC-MP8 28
2.9 HERSTELLUNG KOMPETENTER BAKTERIEN 30
2.10 TRANSFORMATION VON BAKTERIEN MIT PUC 31
2.11 MINIPREP-ISOLATION DER PLASMID-DNA 32
2.12 SEQUENZREAKTIONEN PUC 34
2.12.1 STAMMLOESUNGEN 34
2.12.2 VORBEREITUNG DES SEQUENZIERUNGSGELS 37
2.12.3 VORBEREITUNG DER PROBEN 39
2.12.4 AUSWERTUNG DES GELS 42
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. ERGEBNISSE UND DISKUSSION 43
3.1 GRUNDSAETZLICHE UEBERLEGUNGEN 43
3.2 VORARBEITEN 44
3.2.1 DAS OBERFLAECHENGLYKOPROTEIN GP75 44
3.2.2 ASSOZIATION MIT MYKOPLASMEN-INFEKTIONEN 46
3.2.3 DNA-ISOLIERUNG 47
3.3 DAS DNA-FRAGMENT 75-1 49
3.3.1 LAMBDA-SEQUENZEN 49
3.3.2 VERLUST DER ECOR1-SCHNITTSTELLE 53
3.3.3 PUC-SEQUENZEN 54
3.3.4 VERIFIZIERUNG DER SEQUENZ 57
3.3.5 BESCHREIBUNG DER SEQUENZ 58
3.3.6 VERGLEICH DER SEQUENZ MIT PROTEINBANKEN 59
3.3.7 URSPRUNG DER SEQUENZ 60
3.4 WEITERES VORGEHEN 61
4. ZUSAMMENFASSUNG 63
5. ANHANG 64
6. LITERATUR
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