Einfluss von CD44 auf Tumorwachstum und Metastasierung des malignen Melanoms im Xenograftmodell:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
Hamburg
[2018]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1. ARBEITSHYPOTHESE UND FRAGESTELLUNG 6
2. EINLEITUNG 7
2.1 MALIGNES MELANOM 7
2.1.1 EPIDEMIOLOGIE UND AETIOLOGIE 7
2.1.2 KLINIK 7
2.1.3 METASTASIERUNG 8
2.1.4 STADIEN 9
2.1.5 DIAGNOSTIK 10
2.1.6 THERAPIE 11
2.2 CD44 13
2.3 METASTASIERUNGSKASKADE 15
3. MATERIAL 19
3.1 GERAETE 19
3.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN 19
3.3 CHEMIKALIEN 20
3.4 FERTIGE KITS UND LOESUNGEN 21
3.5 ANTIKOERPER UND ISOTYPENKONTROLLEN IMMUNHISTOCHEMIE 21
3.6 ANTIKOERPER UND ISOTYPENKONTROLLEN DURCHFLUSSZYTOMETRIE 22
3.7 ANGESETZTE PUFFER UND LOESUNGEN 23
3.8 OLIGONUKLEOTIDE 23
4. METHODEN 24
4.1 METHODEN IN VITRO 24
4.1.1 VERWENDETE ZELLLINIEN 24
4.1.2 GRUNDLAGEN DER ZELLKULTUR 24
4.1.3 ZELLPROLIFERATIONSVERSUCH 25
4.1.4 COLONY FORMING ASSAY 25
4.1.5 MIGRATIONSASSAY 26
4.1.6 INVASIONSASSAY 26
4.1.7 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 27
4.1.8 VERSUCHE ZUR INTERAKTION VON MELANOMZELLEN MIT ENDOTHEL UNTER
FLUSS 29
4.1.9 MYCOPLASMENTEST 29
4.2 METHODEN IN VIVO 29
4.2.1 SCID-MAUS 29
4.2.2 HALTUNG DER TIERE 30
4.2.3 INOKULATION DER TUMORZELLEN 30
4.3 AUFARBEITUNG DER GEWEBE 31
4.3.1 EINBETTEN 31
4.3.2 HE-FAERBUNG 31
4.3.3 AUSZAEHLEN DER METASTASEN 31
4.3.4 IMMUNHISTOCHEMIE 32
4.3.4.1 CD44 FAERBUNG DER TUMORE 32
4.3A 2 N- UND E-CADHERIN-FAERBUNG DER TUMORE 33
4.3.4.3 LICAM-FAERBUNG DER TUMORE 34
4.3.5 ALU-PCR 34
4.3.5.1 DNA-EXTRAKTION 35
4.3.5.1.1 GEHIRN UND LEBER 35
4.3.5.1.2 LUNGE 35
4.3.5.1.3 KONTROLLZELLEN AUS ZELLKULTUR, BLUT, KNOCHENMARK 36
4.3.5.2 ALU-PCR 37
5. ERGEBNISSE 39
5.1 STABILITAET DES CD44-KNOCKDOWNS 39
5.2 ZELLPROLIFERATIONSVERSUCH 39
5.3 COLONY FORMING ASSAY 40
5.4 MIGRATION UND INVASION 42
5.5. DURCHFLUSSZYTOMETRIE 42
5.5.1 CD44 SUBTYPEN 42
5.5.2 CD24 42
5.5.3 LI CAM 43
5.5.4 IC AMI 43
5.5.5 SELEKTIN-BINDUNGSSTELLEN 43
5.5.6 INTEGRINE 44
5.6 VERSUCHE ZUR INTERAKTION VON MELANOMZELLEN MIT ENDOTHEL UNTER FLUSS
47
5.7 UEBERLEBEN DER MAEUSE 48
5.8 AUSMASS DER METASTASIERUNG 49
5.8.1 ZAEHLUNG DER LUNGENMETASTASEN 49
5.8.2 ALU-PCR 49
5.8.2.3 ALU-PCR AUS DER LUNGE 50
5.8.2.4 ALU-PCR AUS DER LEBER 50
5.8.2.5 ALU-PCR AUS DEM GEHIRN 50
5.8.2.6 ALU-PCR AUS DEM KNOCHENMARK 51
5.8.2.6 ALU-PCR AUS DEM BLUT 51
5.9 IMMUNHISTOCHEMIE 51
5.9.1 STABILITAET DES KNOCKDOWNS IN DEN TUMOREN 51
5.9.2 CADHERINE IN DEN PRIMAERTUMOREN 52
5.9.3 LI CAM IN DEN PRIMAERTUMOREN 55
5.9.4 CD44 IN DEN LUNGENMETASTASEN 57
6. DISKUSSION 59
7. ZUSAMMENFASSUNG/SUMMARY 65
8. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 67
9. LITERATURVERZEICHNIS 68
10. DANKSAGUNG 75
11. LEBENSLAUF 76
12. EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG
77
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