Diagnostik der Niemann-Pickschen Erkrankung und anderer Lipidosen: der Einfluß von low density lipoprotein (LDL) auf die Aktivität der sauren Sphingomyelinase bei Niemann-Pick A, B und C und die Bedeutung der Chitotriosidase
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2007
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1. Einleitung
1.1 Niemann Pick A und B
1.1.1 Krankheitsbild
1.1.2 Pathologie
1.1.3 Sphingomyel inase
114 Diagnostik
12 Niemann Pick C
1.2.1 Krankheitsbild
1.2.2 Diagnostik
1.3 Chitotriosidase
1.4 Morbus Gaucher
15 Morbus Krabbe
2. Zielsetzung der Arbeit
3. Material
3.1 Material ien und Geräte
3.1.1 Probenmaterial
3.1.2 Chemikalien und Reagenzien
3.1.3 Geräte
4. Methoden
4.1 Leukozytenpräparation
4.2 Proteinbestimmung nach Lowry
4.2.1 Prinzip
4.2.2 Durchführung
4 3 Bestimmung der Chitotnosidase Aktivität
4.3.1 Reaktionsprinzip
4.3.2 Testablauf
4.3.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4 4 Spektralphotometrische Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase (acid
sphingomyelinase, ASMase)
4.4.1 Reaktionsprinzip
4.4.2 Testablauf
4.4.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.4.4 Modifizierter Testablauf
4.4.5 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität für den modifizierten Testablauf
4.5 Radioisotopische Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase (ASMase)
4.5.1 Reaktionsprinzip
4.5.2 Testablauf
4.5.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.6 Fluoreszenzphotometnsche Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase
(ASMase)
4.6.1 Reaktionsprinzip
4.6.2 Testablauf
4 6.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.6.4 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität bei Testablauf mit Leerwerten
4 7 Bestimmung der ß Glukosidase Aktivität
4.7.1 Reaktionsprinzip
4.7.2 Testablauf
4 7.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
5. Patienten
5.1 Niemann Pick A
5.2 Niemann Pick B
5.3 Niemann Pick C
6. Ergebnisse
6.1 Ergebnisse der Messung von Sphingomyelinaseaktivität (ASMaseaktivität)
6.1.1 Spektralphotometrische Messmethode
6.1.1.1 Vergleich zwischen konventionellem und modifiziertem Testablauf bei der
spektralphotometrischen Bestimmung der ASMaseaktivität
6.1.1.2 Normalwerte der ASMaseaktivität in Leukozyten mit und ohne Zugabe von LDL,
spektralphotometrisch gemessen, modifizierter Testablauf
6! .1.3 Proteinabhängigkeit
6.1.2 Radioisotopische Messmethode
6.1.2.1 Normwerte ohne und mit Zugabe von LDL
6.1.2 2 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
6.1.3 Fluoreszenzphotometrische Messmethode
6.1.3.1 Normwerte ohne und mit Zugabe von LDL ohne Leerwerte gegen Standards gemessen
6.1.3.2 Norwerte ohne und mit Zugabe von LDL ohne Leerwerte gegen Standards gemessen
6.1.3.3 Stabilitätsmessungen in Sonifikaten aus Leukozyten
6 1.3.4 Proteinabhängigkeit
6.1.3.5 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
6.2 Ergebnisse der Messung von Chitotriosidaseaktivität
6.2 1 Normwerte für Chitotriosidase im Plasma
6.2.2 Enzymkinetik
62.3 Inkubationszeitabhängigkeit
6.2.4 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit Lipidosen
6.2.4.1 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Niemann Pick A,B und C
6.2.4.2 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Gaucher
6.2.4.3 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Krabbe
6 3 Ergebnisse der Messung von Glukozerebrosidaseaktivität (ß Glucosidase) in
Leukozyten
6.3.1 Normwerte für Glukozerebrosidase
6 3.2 Glukozerebrosidaseaktivität in Patientenleukozyten
7 Diskussion
7.1 Spektralphotometrische Messung der ASMase
7.2 Radioisotopische Messung der ASMase
7.3 Fluoreszenzphotometrische Messung der ASMase
7.3.1 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
7.4 Chitotriosidase und Glukozerebrosidase
8. Zusammenfassung
9. Literaturverzeichnis
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1. Einleitung
1.1 Niemann Pick A und B
1.1.1 Krankheitsbild
1.1.2 Pathologie
1.1.3 Sphingomyel inase
114 Diagnostik
12 Niemann Pick C
1.2.1 Krankheitsbild
1.2.2 Diagnostik
1.3 Chitotriosidase
1.4 Morbus Gaucher
15 Morbus Krabbe
2. Zielsetzung der Arbeit
3. Material
3.1 Material ien und Geräte
3.1.1 Probenmaterial
3.1.2 Chemikalien und Reagenzien
3.1.3 Geräte
4. Methoden
4.1 Leukozytenpräparation
4.2 Proteinbestimmung nach Lowry
4.2.1 Prinzip
4.2.2 Durchführung
4 3 Bestimmung der Chitotnosidase Aktivität
4.3.1 Reaktionsprinzip
4.3.2 Testablauf
4.3.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4 4 Spektralphotometrische Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase (acid
sphingomyelinase, ASMase)
4.4.1 Reaktionsprinzip
4.4.2 Testablauf
4.4.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.4.4 Modifizierter Testablauf
4.4.5 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität für den modifizierten Testablauf
4.5 Radioisotopische Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase (ASMase)
4.5.1 Reaktionsprinzip
4.5.2 Testablauf
4.5.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.6 Fluoreszenzphotometnsche Bestimmung der Aktivität der sauren Sphingomyelinase
(ASMase)
4.6.1 Reaktionsprinzip
4.6.2 Testablauf
4 6.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
4.6.4 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität bei Testablauf mit Leerwerten
4 7 Bestimmung der ß Glukosidase Aktivität
4.7.1 Reaktionsprinzip
4.7.2 Testablauf
4 7.3 Formel zur Berechnung der Enzymaktivität
5. Patienten
5.1 Niemann Pick A
5.2 Niemann Pick B
5.3 Niemann Pick C
6. Ergebnisse
6.1 Ergebnisse der Messung von Sphingomyelinaseaktivität (ASMaseaktivität)
6.1.1 Spektralphotometrische Messmethode
6.1.1.1 Vergleich zwischen konventionellem und modifiziertem Testablauf bei der
spektralphotometrischen Bestimmung der ASMaseaktivität
6.1.1.2 Normalwerte der ASMaseaktivität in Leukozyten mit und ohne Zugabe von LDL,
spektralphotometrisch gemessen, modifizierter Testablauf
6! .1.3 Proteinabhängigkeit
6.1.2 Radioisotopische Messmethode
6.1.2.1 Normwerte ohne und mit Zugabe von LDL
6.1.2 2 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
6.1.3 Fluoreszenzphotometrische Messmethode
6.1.3.1 Normwerte ohne und mit Zugabe von LDL ohne Leerwerte gegen Standards gemessen
6.1.3.2 Norwerte ohne und mit Zugabe von LDL ohne Leerwerte gegen Standards gemessen
6.1.3.3 Stabilitätsmessungen in Sonifikaten aus Leukozyten
6 1.3.4 Proteinabhängigkeit
6.1.3.5 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
6.2 Ergebnisse der Messung von Chitotriosidaseaktivität
6.2 1 Normwerte für Chitotriosidase im Plasma
6.2.2 Enzymkinetik
62.3 Inkubationszeitabhängigkeit
6.2.4 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit Lipidosen
6.2.4.1 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Niemann Pick A,B und C
6.2.4.2 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Gaucher
6.2.4.3 Chitotriosidaseaktivität bei Patienten mit M. Krabbe
6 3 Ergebnisse der Messung von Glukozerebrosidaseaktivität (ß Glucosidase) in
Leukozyten
6.3.1 Normwerte für Glukozerebrosidase
6 3.2 Glukozerebrosidaseaktivität in Patientenleukozyten
7 Diskussion
7.1 Spektralphotometrische Messung der ASMase
7.2 Radioisotopische Messung der ASMase
7.3 Fluoreszenzphotometrische Messung der ASMase
7.3.1 ASMaseaktivität in Patientenleukozyten
7.4 Chitotriosidase und Glukozerebrosidase
8. Zusammenfassung
9. Literaturverzeichnis |
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