Immuntherapie von Tumoren mit den Pattern-Recognition-Rezeptor-Liganden CpG und poly(I:C) hemmt die Funktion myeloischer Suppressorzellen:
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( V.I }
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. GESCHICHTE UND PRINZIPIEN DER IMMUNOLOGISCHEN THERAPIE 1
1.1.1. IMMUNTHERAPIE ZUR BEHANDLUNG VON INFEKTIONSKRANKHEITEN 1
1.1.2. ENTWICKLUNG IMMUNOLOGISCHER ANSAETZE FUER DIE THERAPIE VON
TUMORERKRANKUNGEN 1
1.1.3. BEHINDERUNG DER IMMUNTHERAPIE DURCH TUMORALE ESCAPE-MECHANISMEN 2
1.2. THERAPEUTISCHE NUTZUNG DES ANGEBORENEN IMMUNSYSTEMS DURCH
STIMULATION VON PATTERN-RECOGNITION-REZEPTOREN 3
1.2.1. STIMULATION VON TO/W/FCE-REZEPTOREN ALS THERAPEUTISCHER ANSATZ 4
1.2.2. STIMULATION INTRAZELLULAERER RIG-L-VERWANDTER REZEPTOREN ALS
THERAPEUTISCHER ANSATZ... 8
1.3. EIGENSCHAFTEN, VORKOMMEN UND THERAPEUTISCHE NUTZUNG MYELOISCHER
SUPPRESSORZELLEN (MDSCS) 10
1.3.1. DEFINITION VON MDSCS UEBER PHAENOTYP UND FUNKTION 10
1.3.2. EXPANSION UND AKTIVIERUNG VON MDSCS ALS FOLGE
PATHOPHYSIOLOGISCHER PROZESSE ....11
1.3.3. MECHANISMEN DERT-ZELL-HEMMUNG IM RAHMEN DER MDSC-VERMITTELTEN
IMMUNSUPPRESSION 12
2 . ZIEL DER VORLIEGENDEN DISSERTATION 14
3 . MATERIAL UND METHODEN 15
3.1. MATERIAL 15
3.1.1. GERAETE 15
3.1.2. CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 15
3.1.3. PUFFER UND LOESUNGEN 17
3.2. ZELLULAER-IMMUNOLOGISCHE METHODEN 18
3.2.1. ZELLKULTUR 18
3.2.2. C26-ZELLKULTIVIERUNG 18
3.2.3. DURCHFLUSSZYTOMETRIE (FACS) 19
3.2.4. MAGNETISCHE ZELLSEPARATION (MACS) 21
3.2.5. ENZYME-IINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) 23
3.2.6. BRDU-PROLIFERATIONSASSAY 25
3.3. TIERVERSUCHE 26
3.3.1. ETHISCHE UND GESETZLICHE GRUNDLAGEN 26
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IMAGE 2
{ V M }
3.3.2. SUBKUTANES C26-TUMORMODELL UND TUMORTHERAPIE 27
3.4. STATISTISCHE ANALYSE UND DARSTELLUNG 28
4 . ERGEBNISSE 29
4.1. EXPANSION DER MDSC-SUBPOPULATIONEN IM C26-TUMORMODELL 29
4.1.1. NACHWEIS VON PMN-MDSC UND MO-MDSCS IM C26-TUMORMODELL 29
4.1.2. EXPANSION BEIDER MDSC-SUBPOPULATIONEN NACH C26-TUMORINDUKTION 31
4.2. VERSTAERKTE IMMUNSUPPRESSIVITAET DER MDSC-SUBPOPULATIONEN IM
C26-TUMORMODELL 32
4.2.1. ENTWICKLUNG EINES DREISCHRITTIGEN MACS-PROTOKOLLS ZUR ISOLATION
VON PMN-MDSCS UND MO-MDSCS AUS SPLENOZYTEN 32
4.2.2. ETABLIERUNG VON SUPPRESSIONSASSAYS ZUM NACHWEIS DER SUPPRESSIVEN
FUNKTION DER MDSC-SUBPOPULATIONEN 35
4.2.3. STAERKERE SUPPRESSION VON T-ZELLEN DURCH PMN-IMCS ALS DURCH
MO-IMCS 38
4.2.4. VERSTAERKUNG DER HEMMENDEN FUNKTION DER MDSC-SUBPOPULATIONEN DURCH
C26TUMORINDUKTION 41
4.2.5. STAERKERE HEMMUNG DURCH PMN-MDSCS ALS DURCH MO-MDSCS 44
4.3. HEMMENDER EFFEKT DER IMMUNTHERAPIE AUF DIE SUPPRESSIVE FUNKTION DER
MDSCSUBPOPULATIONEN 46
4.3.1. EXPERIMENTELLER ANSATZ ZUR UNTERSUCHUNG DER IMMUNTHERAPIE 46
4.3.2. RUECKGANG DES C26-TUMORWACHSTUM UNTER PRR-THERAPIE 48
4.3.3. EINSCHRAENKUNG DER HEMMENDEN FUNKTION VON PMN-MDSCS UND MO-MDSCS
DURCH IMMUNTHERAPIE 49
5. DISKUSSION 55
5.1. UNTERSCHEIDUNG DER SUBPOPULATIONEN DER PMN-MDSCS UND MO-MDSCS 55
5.1.1. DIFFERENZIERTE BETRACHTUNG DER MDSC-SUBPOPULATIONEN ALS
VORAUSSETZUNG EINER GEZIELTEREN TUMORTHERAPIE 55
5.1.2. PROBLEM DER UNTERTEILUNG DER MDSCS AN HAND VON OBERFLAECHENMARKERN
55
5.1.3. VORTEIIE DER EINTEILUNG VON MDSCS IN DIE SUBPOPULATIONEN DER
PMN-MDSCS UND MOMDSCS 57
5.1.4. AUFREINIGUNGSVARIANTEN ALS MOEGLICHER GRUND FUER ABWEICHENDE
ANGABEN ZUR SUPPRESSIVITAET DER MDSC-SUBPOPULATIONEN 59
5.2. VERRINGERTE IMMUNSUPPRESSIVITAET DER MDSC-SUBPOPULATIONEN DURCH
THERAPIE MIT CPG UND POLY(L:C) 61
IMAGE 3
5.2.1. MDSC-SUBPOPULATIONEN ALS MOEGLICHER TEIL DES FUNKTIONSMECHANISMUS
DER
ANTITUMORALEN PRR-THERAPIE 61
5.2.2. MOEGLICHER EINFLUSS UNTERSCHIEDLICHER THERAPIESCHEMATA AUF DIE
IMMUNSUPPRESSIVITAET DER MDSC-SUBPOPULATIONEN 63
5.3. MDSCS ALS ANSATZPUNKT EINER VERBESSERTEN IMMUNTHERAPIE VON
TUMORERKRANKUNGEN 64
5.4. EINORDNUNG UND BEWERTUNG DER ERGEBNISSE 66
6. ZUSAMMENFASSUNG 67
7 . LITERATURVERZEICHNIS 68
8 . VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN UND AKRONYME 83
9 . DANKSAGUNG 86
1 0 . VEROEFFENTLICHUNGEN 87
11. LEBENSLAUF 88
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