Effekte von FGF2, CCN2, S1P und IHH auf die Proliferationsrate und den Phänotyp humaner Chondrozyten:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2021]
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 162 Seiten Illustrationen, Diagramme 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
| _version_ | 1804184050475204609 |
|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
...................................................................................................................................................
1
2
GRUNDLAGEN
...............................................................................................................................................
2
2.1
DER
GELENKKNORPEL:
AUFBAU,
FUNKTION
UND
BESONDERHEITEN
...................................................
2
2.2
DIE
ZELLEN
DES
KNORPELS:
CHONDROZYTEN
.......................................................................................
3
2.3
EXTRAZELLULARMATRIX:
KOMPONENTEN,
SYNTHESE
UND
FUNKTION
..................................................
4
2.4
OSTEOARTHRITIS:
URSACHEN,
FOLGEN,
RISIKOFAKTOREN
......................................................................
5
2.5
POSTTRAUMATISCHE
OSTEOARTHRITIS
(PTOA)
.....................................................................................
7
2.6
UEBERSICHT
ALLER
AKTUELLEN
BEHANDLUNGSMETHODEN
.....................................................................
8
2.7
SUBSTANZEN
ZUR
INDUKTION
EINER
CHONDROZYTENPROLIFERATION
...................................................
9
2.7.1
CCN2
-
CONNECTIVE
TISSUE
GROWTH
FACTOR
(CTGF)...............................................................................
9
2.7.2
FIBROBLAST
GROWTH
FACTOR
2
(FGF2)......................................................................................................
10
2.7.3
S1P
-
SPHINGOSIN-L-PHOSPHAT
..............................................................................................................
12
2.7.4
IHH
-
INDIAN
HEDGEHOG
.........................................................................................................................
13
2.8
ASSOZIATIONEN
VON
CHONDROZYTEN-MORPHOLOGIE
AUF
DIFFERENZIERUNG
UND
GENEXPRESSION
14
2.9
PAA-HYDROGELE
ALS
MODELL
EINER
PHYSIOLOGISCHEN
ECM
.........................................................
16
3
ZIELE
DER
ARBEIT
.....................................................................................................................................
17
4
MATERIAL
UND
METHODEN
....................................................................................................................
18
4.1
TECHNISCHE
GERAETE
.........................................................................................................................18
4.2
LABORARTIKEL
.....................................................................................................................................19
4.3
CHEMISCHE
REAGENZIEN
.................................................................................................................
20
4.4
ISOLATION
HUMANER
CHONDROZYTEN
...............................................................................................
21
4.5
MEDIENWECHSEL
UND
PASSAGIEREN
VON
CHONDROZYTEN
............................................................
23
4.6
HERSTELLUNG
VON
PAA-HYDROGELEN
...............................................................................................
24
4.7
AUSSAEEN
HUMANER
CHONDROZYTEN
AUF
0,2%
PAA-HYDROGELE
..................................................
25
4.8
INKUBATION
MIT
FGF2,
S1P,
CCN2
UND
IHH
.................................................................................
25
4.9
FLUORESZENZFAERBUNG
HUMANER
CHONDROZYTEN
FUER
MORPHOMETRISCHE
ANALYSEN
..................
26
4.10
MEDIUMWECHSEL
AN
TAG
3
............................................................................................................
27
4.11
FAERBUNG
UND
MIKROSKOPIE
AN
TAG
4
...........................................................................................
27
4.12
FIJI-BASIERTE
MORPHOMETRIE
MIT
DEM
YYTRAINABLE
WEKA
SEGMENTATION
TOOL
...................
27
4.13
QUANTIFIZIERUNG
DER
EXPRESSION
VON
SOX9,
ACAN,
COL1A2
UND
COL2A1
ANHAND
DER
DDPCR
29
4.13.1
RNA
ISOLATION
....................................................................................................................................30
4.13.2
RNA
MESSUNG
..................................................................................................................................30
4.13.3
UMSCHREIBUNG
DER
RNA
IN
CDNA
....................................................................................................31
4.13.4
DIE
DIGITALE
DROPLET
POLYMERASE
KETTENREAKTION
(DDPCR)
...........................................................31
4.14
BERECHNUNG
DER
PROLIFERATIONSRATEN
.........................................................................................
33
4.15
STATISTISCHE
ANALYSE
......................................................................................................................
33
5
ERGEBNISSE
................................................................................................................................................
35
5.1
FGF2:
ERGEBNISSE
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
..........
35
5.2
S1P:
ERGEBNISSE
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
............
40
5.3
CCN2:
ERGEBNISSE
DER
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
..........
47
5.4
IHH:
ERGEBNISSE
DER
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
.............
51
5.5
EINLEITUNG
IN
DEN
ZWEITEN
TEIL
.....................................................................................................
57
5.6
DER
EINFLUSS
VON
INDIAN
HEDGEHOG
AUF
CHONDROZYTEN
BEZUEGLICH
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
1
.....................................................................................
58
5.7
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
2
............................
64
5.8
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
3
............................
69
5.9
EINFLUSS
DER
PASSAGIERUNG
AUF
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
DIE
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN?
.....................................................................................................................................
74
5.10
GRAD
1
VS.
GRAD
2:
EINFLUSS
DER
MAKROSKOPISCHEN
GEWEBEQUALITAET
AUF
DAS
CHONDROGENE
VERHALTEN?
.....................................................................................................................................................
84
5.10.1
VERGLEICH
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN
IN
PASSAGE
1
ZWISCHEN
VERSCHIEDEN
GEWEBEQUALITAETEN
........................................................................................................
84
5.10.2
DER
VERGLEICH
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN
IN
PASSAGE
2
ZWISCHEN
VERSCHIEDENEN
GEWEBEQUALITAETEN
....................................................................................................92
5.10.3
DER
VERGLEICH
VON
MORPHOLOGIE
UND
DDPCR
IN
PASSAGE
3
ZWISCHEN
VERSCHIEDEN
GEWEBEQUALITAETEN
.............................................................................................................................................
96
5.11
DIE
PARTIAL
LEAST
SQUARE
ANALYSE:
WIE
KORRELIERT
DIE
EXPRESSION
CHONDROGENER
MARKER
MIT
FORMDESKRIPTOREN
UND
ZELLEN/BILD-RATE?
......................................................................................
101
5.11.1
SOX9:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
..............................................................................................................................................101
5.11.2
ACAN:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
..............................................................................................................................................104
5.11.3
COL1A2:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
...............................................................................................................................................106
5.11.4
COL2A1:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
PROLIFERATION,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
...............................................................................................................................................109
5.12
DIE
PEARSON-KORRELATIONSANALYSE
.............................................................................................
111
5.12.1
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
1
............................................................................................................112
5.12.2
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
2
............................................................................................................113
5.12.3
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
3
............................................................................................................114
5.12.4
KORRELATIONEN
UEBER
ALLE
PASSAGEN
.................................................................................................115
5.12.5
KORRELATION
VON
MORPHOLOGIE-DATEN
PI
MIT
DDPCR-DATEN
P2
...................................................117
5.12.6
KORRELATIONEN
DER
MORPHOLOGIE-DATEN
IN
PASSAGE
1
MIT
DDPCR-DATEN
IN
PASSAGE
3
..............118
5.12.7
DARSTELLUNG
AUSGEWAEHLTER
KORRELATIONEN
IN
PUNKTDIAGRAMMEN
MIT
TRENDLINIE
.......................120
5.13
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
...........................................................................................
126
6
DISKUSSION
..............................................................................................................................................
130
6.1
DISKUSSION
DES
ERSTEN
VERSUCHSTEILS
.......................................................................................
130
6.1.1
FGF2
......................................................................................................................................................
131
6.1.2
S1P
........................................................................................................................................................
132
6.1.3
CCN2
......................................................................................................................................................
133
6.1.4
IHH
........................................................................................................................................................
133
6.2
UEBERARBEITUNG
DES
PROTOKOLLS
...................................................................................................
134
6.3
DISKUSSION
DES
ZWEITEN
VERSUCHSTEILS
......................................................................................
135
6.3.1
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
1
.............................................................................135
6.3.2
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
2
.............................................................................136
6.3.3
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
3
.............................................................................137
6.4
VERGLEICH
ZWISCHEN
DEN
PASSAGEN.............................................................................................
138
6.5
VERGLEICH
NACH
MAKROSKOPISCHER
GEWEBSQUALITAET
................................................................
139
6.6
PLS
...................................................................................................................................................
141
6.7
PEARSON
KORRELATIONSANALYSE
.....................................................................................................
142
6.8
BEDEUTUNG
DER
ERGEBNISSE
UND
AUSBLICK
.................................................................................
144
7
ZUSAMMENFASSUNG
.............................................................................................................................
146
8
LITERATURVERZEICHNIS
..........................................................................................................................
147
9
PUBLIKATION/EN
....................................................................................................................................
158
10
ANHANG
..................................................................................................................................................
159
10.1
LEBENSLAUF
.....................................................................................................................................
159
10.2
DANKSAGUNG
...................................................................................................................................
161
10.3
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERN
NG
.....................................................................................................
162
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
2
GRUNDLAGEN
.
2
2.1
DER
GELENKKNORPEL:
AUFBAU,
FUNKTION
UND
BESONDERHEITEN
.
2
2.2
DIE
ZELLEN
DES
KNORPELS:
CHONDROZYTEN
.
3
2.3
EXTRAZELLULARMATRIX:
KOMPONENTEN,
SYNTHESE
UND
FUNKTION
.
4
2.4
OSTEOARTHRITIS:
URSACHEN,
FOLGEN,
RISIKOFAKTOREN
.
5
2.5
POSTTRAUMATISCHE
OSTEOARTHRITIS
(PTOA)
.
7
2.6
UEBERSICHT
ALLER
AKTUELLEN
BEHANDLUNGSMETHODEN
.
8
2.7
SUBSTANZEN
ZUR
INDUKTION
EINER
CHONDROZYTENPROLIFERATION
.
9
2.7.1
CCN2
-
CONNECTIVE
TISSUE
GROWTH
FACTOR
(CTGF).
9
2.7.2
FIBROBLAST
GROWTH
FACTOR
2
(FGF2).
10
2.7.3
S1P
-
SPHINGOSIN-L-PHOSPHAT
.
12
2.7.4
IHH
-
INDIAN
HEDGEHOG
.
13
2.8
ASSOZIATIONEN
VON
CHONDROZYTEN-MORPHOLOGIE
AUF
DIFFERENZIERUNG
UND
GENEXPRESSION
14
2.9
PAA-HYDROGELE
ALS
MODELL
EINER
PHYSIOLOGISCHEN
ECM
.
16
3
ZIELE
DER
ARBEIT
.
17
4
MATERIAL
UND
METHODEN
.
18
4.1
TECHNISCHE
GERAETE
.18
4.2
LABORARTIKEL
.19
4.3
CHEMISCHE
REAGENZIEN
.
20
4.4
ISOLATION
HUMANER
CHONDROZYTEN
.
21
4.5
MEDIENWECHSEL
UND
PASSAGIEREN
VON
CHONDROZYTEN
.
23
4.6
HERSTELLUNG
VON
PAA-HYDROGELEN
.
24
4.7
AUSSAEEN
HUMANER
CHONDROZYTEN
AUF
0,2%
PAA-HYDROGELE
.
25
4.8
INKUBATION
MIT
FGF2,
S1P,
CCN2
UND
IHH
.
25
4.9
FLUORESZENZFAERBUNG
HUMANER
CHONDROZYTEN
FUER
MORPHOMETRISCHE
ANALYSEN
.
26
4.10
MEDIUMWECHSEL
AN
TAG
3
.
27
4.11
FAERBUNG
UND
MIKROSKOPIE
AN
TAG
4
.
27
4.12
FIJI-BASIERTE
MORPHOMETRIE
MIT
DEM
YYTRAINABLE
WEKA
SEGMENTATION
TOOL"
.
27
4.13
QUANTIFIZIERUNG
DER
EXPRESSION
VON
SOX9,
ACAN,
COL1A2
UND
COL2A1
ANHAND
DER
DDPCR
29
4.13.1
RNA
ISOLATION
.30
4.13.2
RNA
MESSUNG
.30
4.13.3
UMSCHREIBUNG
DER
RNA
IN
CDNA
.31
4.13.4
DIE
DIGITALE
DROPLET
POLYMERASE
KETTENREAKTION
(DDPCR)
.31
4.14
BERECHNUNG
DER
PROLIFERATIONSRATEN
.
33
4.15
STATISTISCHE
ANALYSE
.
33
5
ERGEBNISSE
.
35
5.1
FGF2:
ERGEBNISSE
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
.
35
5.2
S1P:
ERGEBNISSE
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
.
40
5.3
CCN2:
ERGEBNISSE
DER
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
.
47
5.4
IHH:
ERGEBNISSE
DER
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATEN
.
51
5.5
EINLEITUNG
IN
DEN
ZWEITEN
TEIL
.
57
5.6
DER
EINFLUSS
VON
INDIAN
HEDGEHOG
AUF
CHONDROZYTEN
BEZUEGLICH
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
1
.
58
5.7
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
2
.
64
5.8
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETE
PROLIFERATIONSRATE
IN
PASSAGE
3
.
69
5.9
EINFLUSS
DER
PASSAGIERUNG
AUF
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
DIE
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN?
.
74
5.10
GRAD
1
VS.
GRAD
2:
EINFLUSS
DER
MAKROSKOPISCHEN
GEWEBEQUALITAET
AUF
DAS
CHONDROGENE
VERHALTEN?
.
84
5.10.1
VERGLEICH
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN
IN
PASSAGE
1
ZWISCHEN
VERSCHIEDEN
GEWEBEQUALITAETEN
.
84
5.10.2
DER
VERGLEICH
VON
MORPHOMETRIE,
DDPCR
UND
ERRECHNETEN
PROLIFERATIONSRATEN
IN
PASSAGE
2
ZWISCHEN
VERSCHIEDENEN
GEWEBEQUALITAETEN
.92
5.10.3
DER
VERGLEICH
VON
MORPHOLOGIE
UND
DDPCR
IN
PASSAGE
3
ZWISCHEN
VERSCHIEDEN
GEWEBEQUALITAETEN
.
96
5.11
DIE
PARTIAL
LEAST
SQUARE
ANALYSE:
WIE
KORRELIERT
DIE
EXPRESSION
CHONDROGENER
MARKER
MIT
FORMDESKRIPTOREN
UND
ZELLEN/BILD-RATE?
.
101
5.11.1
SOX9:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
.101
5.11.2
ACAN:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
.104
5.11.3
COL1A2:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
ZELLEN/BILD-RATE,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
.106
5.11.4
COL2A1:
KORRELATION
DER
EXPRESSION
MIT
FORMDESKRIPTOREN,
PROLIFERATION,
KULTIVIERUNGSZEIT
UND
GABE
VON
IHH
.109
5.12
DIE
PEARSON-KORRELATIONSANALYSE
.
111
5.12.1
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
1
.112
5.12.2
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
2
.113
5.12.3
KORRELATIONEN
IN
PASSAGE
3
.114
5.12.4
KORRELATIONEN
UEBER
ALLE
PASSAGEN
.115
5.12.5
KORRELATION
VON
MORPHOLOGIE-DATEN
PI
MIT
DDPCR-DATEN
P2
.117
5.12.6
KORRELATIONEN
DER
MORPHOLOGIE-DATEN
IN
PASSAGE
1
MIT
DDPCR-DATEN
IN
PASSAGE
3
.118
5.12.7
DARSTELLUNG
AUSGEWAEHLTER
KORRELATIONEN
IN
PUNKTDIAGRAMMEN
MIT
TRENDLINIE
.120
5.13
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
126
6
DISKUSSION
.
130
6.1
DISKUSSION
DES
ERSTEN
VERSUCHSTEILS
.
130
6.1.1
FGF2
.
131
6.1.2
S1P
.
132
6.1.3
CCN2
.
133
6.1.4
IHH
.
133
6.2
UEBERARBEITUNG
DES
PROTOKOLLS
.
134
6.3
DISKUSSION
DES
ZWEITEN
VERSUCHSTEILS
.
135
6.3.1
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
1
.135
6.3.2
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
2
.136
6.3.3
DIE
ERGEBNISSE
NACH
GABE
VON
IHH
IN
PASSAGE
3
.137
6.4
VERGLEICH
ZWISCHEN
DEN
PASSAGEN.
138
6.5
VERGLEICH
NACH
MAKROSKOPISCHER
GEWEBSQUALITAET
.
139
6.6
PLS
.
141
6.7
PEARSON
KORRELATIONSANALYSE
.
142
6.8
BEDEUTUNG
DER
ERGEBNISSE
UND
AUSBLICK
.
144
7
ZUSAMMENFASSUNG
.
146
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
147
9
PUBLIKATION/EN
.
158
10
ANHANG
.
159
10.1
LEBENSLAUF
.
159
10.2
DANKSAGUNG
.
161
10.3
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERN
NG
.
162 |
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Es ist kein Print-Exemplar vorhanden.
Inhaltsverzeichnis