Untersuchung der kalziumabhängigen Kaliumkanäle hSK1 und hIK1 in verletzten und unverletzten peripheren Nerven sowie deren Regulation durch neurotrophe Faktoren:
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| Format: | Buch |
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2003
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| Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 2003 |
| Beschreibung: | 126 Bl. Ill., graph. Darst. : 29 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1 EINLEITUNG 5
1.1 NERVENVERLETZUNGEN UND DEREN FOLGEN 5
1.1.1 DAS SPINALGANGLION ALS URSPRUNGSORT FUER EKTOPE ERREGUNGSBILDUNG 5
1.1.2 MECHANISMEN FUER SPONTANE ERREGUNGSBILDUNG 6
1.2 DIE ROLLE NEUROTROPHER FAKTOREN NACH NERVENVERLETZUNG 7
1.3 KALZIUMABHAENGIGE KALIUMKANAELE 10
1.3.1 BK-KANAELE 11
1.3.2 IK-KANAELE 11
1.3.3 SK-KANAELE 14
1.4 SNS1 17
1.5 NEUROTROPHE FAKTOREN 18
1.5.1 DIE FAMILIE DER NEUROTROPHINE 18
1.5.1.1NGF 18
1.5.1.2 NT-3 20
1.5.2 NEUROTROPHE FAKTOREN DER GDNF-FAMILIE 21
1.5.2.1 GDNF 23
2 ZIELSTELLUNGEN DER ARBEIT 24
2.1 NACHWEIS VON HSKL UND HLKL IN MENSCHLICHEN SPINALGANGLIEN UND
NERVEN SOWIE DEREN VERAENDERUNG NACH NERVENVERLETZUNG 24
2.2 ABHAENGIGKEIT DER KALIUMKANAELE HSKL UND HLKL VON NEUROTROPHEN
FAKTOREN 24
3 MATERIAL UND METHODEN 25
3.1 MENSCHLICHE GEWEBE 25
3.1.1 SPINALGANGLIEN 25
3.1.1.1 KLINISCHE DETAILS 25
3.1.2 NERVEN 27
3.1.2.1 KLINISCHE DETAILS 27
3.1.3 HAUT 28
3.2 EINVERSTAENDNIS DER PATIENTEN 28
3.3 RATTENGEWEBE 29
3.3.1 VERSUCHSTIERE 29
3.3.2 PRAEPARATION DER GANGLIEN 29
2
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNI S
3.3.3 SEPARATION DER NEURONE 29
3.3.4 KULTUR DER NEURONE 31
3.4 IMMUNHISTOCHEMIE 32
3.4.1 SPEZIFITAETSTESTS FUER DIE ANTIKOERPER 36
3.4.2 AUSWERTUNG 37
3.4.2.1 NERVENZELLEN 37
3.4.2.2 NERVEN 38
3.5 ELEKTROPHORESE / WESTERN BLOT 39
3.5.1 GEWINNUNG DER PROBEN 39
3.5.2 BESTIMMUNG DES GESAMTPROTEINS 40
3.5.3 ELEKTROPHORESE 40
3.5.4 WESTERN BLOT 42
3.5.5 DARSTELLUNG DER PROTEINE 42
3.5.6 AUSWERTUNG DER BANDEN 44
3.6 STATISTISCHE ANALYSEN 44
4 ERGEBNISSE 46
4.1 MENSCHLICHE GEWEBE 46
4.1.1 IMMUNHISTOCHEMIE 46
4.1.1.1 SPINALGANGLIEN 46
4.1.1.2 NERVEN 50
4.1.1.3 HAUT 53
4.1.2 WESTERN BLOT 54
4.1.2.1 SPINALGANGLIEN MIT HSKL 54
4.1.2.2 SPINALGANGLIEN MIT HLKL 61
4.2 RATTENGEWEBE 62
4.2.1 ZELLKULTUREN 62
4.2.1.1 BIOLOGISCHE AKTIVITAET DER NEUROTROPHEN FAKTOREN 62
4.2.1.2 HSKL 63
4.2.1.3 HLKL 66
4.2.1.4 SNS1 68
4.2.2 GEFRIERSCHNITTE VON SPINALGANGLIEN 72
5 DISKUSSION 73
5.1 HSKL IN SENSORISCHEN NEURONEN 73
5.1.1 MOEGLICHE BEDEUTUNG DES RUECKGANGS VON HSKL 73
3
INHALTSVERZEICHNIS
5.1.2 KORRELATION ZU ELEKTROPHYSIOLOGISCHEN DATEN 75
5.1.3 GROESSE DER IM WESTERN BLOT DARGESTELLTEN BANDEN 76
5.1.3.1 WESTERN BLOT-BANDEN MIT M6 ALS ANTIKOERPER 76
5.1.3.2 WESTERN BLOT-BANDEN MIT LI55 ALS ANTIKOERPER 78
5.2 HLKL IN SENSORISCHEN NEURONEN 80
5.2.1 GEWEBEVERTEILUNG VON HLKL 80
5.2.2 IMMUNHISTOCHEMISCHER RUECKGANG VON HLKL IN SPINALGANGLIEN 81
5.2.3 WESTERN BLOT-ERGEBNISSE FUER HLKL 82
5.2.4 MOEGLICHE BEDEUTUNG DES RUECKGANGES VON HLKL IN SPINALGANGLIEN 83
5.2.5 HLKL IN PERIPHEREN NERVEN 84
5.3 MOEGLICHE URSACHEN FUER DIE VERMINDERUNG VON KALIUMKANAELEN NACH
NERVENVERLETZUNG 85
5.3.1 REGULATION DER ERREGBARKEIT DES SPINALGANGLIENNEURONS 85
5.3.2 UNTERBRECHUNG DES RETROGRADEN AXONALEN TRANSPORTS 86
5.4 ZELLKULTUREN 87
5.4.1 REZEPTORVERTEILUNG FUER NEUROTROPHE FAKTOREN 87
5.4.2 ZELLKULTURERGEBNISSE VOR DEM HINTERGRUND DER REZEPTORVERTEILUNG 89
5.4.2.1 HSKL 89
5.4.2.2 HLKL 90
5.4.2.3 SNS1 91
5.4.3 AUSWAHL DER KONZENTRATIONEN FUER DIE NEUROTROPHEN FAKTOREN 92
5.4.4 MOEGLICHE METHODISCHE FEHLER IN ZELLKULTUREN 92
5.5 KORRELATION DER ERGEBNISSE DES TIERMODELLS MIT DEN BEIM MENSCHEN
GEFUNDENEN VERAENDERUNGEN 94
5.6 MOEGLICHE DARAUS RESULTIERENDE THERAPEUTISCHE ANSAETZE 96
6 ZUSAMMENFASSUNG 97
7 LITERATURLISTE 100
8 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 124
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